Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Клиническая характеристика злокачественных опухолей ЩЖ 11
1.1.1. Гистологическая классификация РЩЖ ...Л 1
1.1.2. Клинико-эпидемиологическая характеристика РЩЖ 12
1.2. Молекулярно-генетические аспекты патогенеза МРЩЖ 14
1.3. Молекулярно-генетические аспекты патогенеза опухолей ЩЖ фолликулярного происхождения 23
1.3.1. Рецептор тиреотропного гормона 24
1.3.2. Протоонкоген RET. 26
1.3.3. ПерестройкаPAX-8/PPARy 36
1.3.4. Протоонкоген ЛГ7Ж/ 38
1.3.5. Протоонкогены семейства RAS 40
1.3.6. Протоонкоген BRAF 43
1.3.7. Протоонкоген МЕТ. , 51
1.3.8. Гены-супрессоры роста опухолей 52
1.4. Резюме 55
Глава 2. Материалы иметоды 57
2.1. Характеристика клинического материала 57
2.2. Забор крови и операционного материала 57
2.3. Выделение геномной ДНК 58
2.4. Выделение РНК из крови и операционного материала 58
2.5. Спектрофотометрическое определение концентрации РНК 59
2.6. Синтез кДНК 59
2.7. Полимеразная цепная реакция 59
2.7.1. ПЦР кодирующих районов гена RET. 60
2.7.2. Сравнительный анализ экспрессии ЕС- и ТК- доменов RET методом полуколичественной RT-PCR 60
2.7.3. Идентификация перестроек RET/PTC1, RET/PTC2, RET/PTC3 и ARFP/RET методом RT-PCR 62
2.7.4. Аллель-специфическая амплификация мутантного аллеля BRAF 62
2.8. Рестриктный анализ 63
2.9. Электрофоретическое разделение ДНК 63
2.9.1. Электрофорез ДНК в неденатурирующем ПААГ 63
2.9.2. Электрофорез ДНК в агарозггом геле 64
2.10. Детекция точковых мутаций методом SSCP 64
2.11.Окрашивание ПААГнитратом серебра 64
2.12. Определение нуклеотидной последовательности 65
2.13. Программное обеспечение 65
Глава 3. Результаты и обсуждение 66
3.1. Молекулярно-генетический анализ гена RET у больных с наследственной и спорадической формами МРЩЖ 66
3.2. Перестройки RET/РТС в тканях ПРЩЖ и других узловых образований ЩЖ 76
3.3. Спектри частота соматических мутациий г&т BRAF при ПРЩЖ и других узловых образовниях ЩЖ 81
3.4. Молекулярно-генетический анализ протоонкогеїюв RETnBRAF у больных с семейным Заключение 102
Выводы 104
Список литературы 105
