Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Общие сведения об аллергических заболеваниях и бронхиальной астме 11
1.2. Роль IL-33 в патогенезе БА 27
1.3. Интерференция РНК 51
Глава 2. Материалы и методы 57
2.1. Аллерген, основные реагенты и другие расходные материалы 57
2.2. Оборудование и другие расходные материалы 58
2.3. Вирус. Культивирование, концентрирование, определение титра. 58
2.4. Проектирование миРНК против IL-33 59
2.5. Определение биологической активности молекул миРНК in vitro 60
2.6. Лабораторные животные и основные манипуляции с ними 60
2.7. Экспериментальный протокол моделирования БА у мышей 61
2.8. Экспериментальный протокол РСВ-инфекции у мышей 62
2.9. Экспериментальный протокол моделирования экспериментальной БА, осложненной вирусной инфекцией 63
2.10. Экспериментальный протокол изучения молекул миРНК направленных к гену il-33, на модели БА, осложненной вирусной инфекцией у мышей 63
2.11. Измерение гиперреактивности бронхов методом неинвазивной плетизмографии 65
2.12. Иммуноферментный анализ 65
2.13. Методика получения бронхоальвеолярного лаважа у лабораторных мышей и оценка его клеточного состава 66
2.14. Приготовление микропрепаратов и гистологическое исследование ткани легких 66
2.15. Выделение РНК, синтез кДНК и определение уровня экспрессии целевых генов в ткани легких 68
2.16. Цитофлюориметрическое исследование клеток, выделенных из ткани легкого 69
2.17. Анализ данных 71
Глава 3. Результаты 72
3.1. Изучение профиля экспрессии гена il-33 при индукции экспериментальной бронхиальной астмы у мышей 72
3.2. Изучение профиля экспрессии IL-33 на модели аллергической бронхиальной астмы, осложненной вирусной инфекцией у мышей 79
3.3. Подавление экспрессии гена il-33 посредством молекул миРНК на модели бронхиальной астмы, осложненной РСВ-инфекцией у мышей 92
Глава 4. Обсуждение 103
4.1. Обсуждение роли IL-33 в патогенезе аллергической БА 103
4.2. Обсуждение роли IL-33 в патогенезе вирус-индуцированных обострений БА 109
4.3. Обсуждение IL-33, как перспективной био-мишени для создания новых способов терапии вирус-индуцированных обострений БА 118
Заключение 122
Выводы 123
Список литературы 125
