Введение
Глава 1. Обзор литературы. Ингибиторные рецепторы лимфоцитов и их роль в противоопухолевом иммунитете 10
1.1. Иммунотерапия онкологических заболеваний ..10
1.1.1 Роль иммунной системы в противоопухолевой защите 10
1.1.2 Использование моноклональных антител в иммунотерапии .11
1.1.3 Использование иммуномодуляторов для стимуляции противоопухолевого иммунного ответа .14
1.1.4 Противоопухолевая вакцинация 17
1.2. Ингибиторные рецепторы лимфоцитов и их лиганды.. 24
1.2.1. Ингибиторные рецепторы, распознающие константную часть молекул иммуноглобулинов 28
1.2.2. Ингибиторные рецепторы, распознающие молекулы главного комплекса гистосовместимости 31
Иммуноглобулипоподобные рецепторы киллерных клеток. 31
Рецепторы CD94/NKG2. 34
Рецепторы семейства Ly49. , 35
1.2.3. Ингибиторные рецепторы, распознающие молекулы В7 семейства 37
Молекула CTLA-4. 37
Молекула PD-1 39
Молекула BTLA 40
1.3. Роль ингибиторных рецепторов и шлигандов в противоопухолевом иммунитете 41
1.4. Неканоническая молекула МНС lb класса HLA-E. 45
Глава 2. Материалы и методы исследования 49
2.1. Ферменты и реактивы ..49
2.2. Клеточные линии ..49
2.3. Электрофорез в ДСН-ПААГ и иммуноблот-анализ ,49
2.4. Выделение тотальной РНК из клеток меланомы человека 51
2.5. ПЦР в реальном времени .51
2.6. Проточная цитометрия 52
2.7. Анализ клеточной цитотоксичности 52
2.8. Статистическая обработка результатов .53
Глава 3. Результаты и обсуждение 54
3.1. Анализ экспрессии мРНК молекулы HLA-E в клетках меланомы человека 54
3.2. Анализ присутствия белка HLA-E в клетках меланомы человека..56
3.3. Поверхностная локализация молекул HLA-E в клетках меланомны человека 58
3.4. Экспрессия HLA-E в клетках меланомы человека под действием INF-y .62
3.5. INF-y стимулирует транспорт молекул HLA-E на клеточную мембрану 64
3.6. Участие протеасомной деградации белков в INF-y стимулированной презентации молекул HLA-E на поверхности клеток.. 68
3.7. Выход молекулы HLA-E на поверхность клеток под действием INF-y защищает клетки меланомы от цитотоксического действия лимфоцитов . 73
Заключение ..77
Выводы .82
Список цитируемой литературы 83
Благодарности 104
