Введение
I. СТРУКТУРА БАКТЕРИОФАГА Т4 И ОСНОВНЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ЕГО СБОРКИ
1. Структурная организация и функции компонентов частицы фага Т4 8
2. Основные принципы и закономерности морфогенеза бактериофага Т4 12
II. МОРФОГЕНЕЗ ХВОСТОВОГО ОТРОСТКА БАКТЕРИОФАГА Т4
1. Морфогенез базальной пластинки 18
2. Сборка хвостового стержня и чехла 24
III. СТРУКТУРА И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА СТЕРЛОШ БАКТЕ РИОФАГА Т4 30
ІV. ХВОСТОВОЙ ЧЕХОЛ БАКТЕРИОФАГА Т4 КАК ПРОСТЕЙШАЯ СОКРАТИТЕЛЬНАЯ СИСТЕМА
1. Физико-химические и агрегациоиные свойства белка хвостовых чехлов 33
2. Молекулярная организация хвостового чехла 38
3. Молекулярный механизм сокращения хвостового чехла 44
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 53
I. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛІЩОВАНИЙ
1. Штаммы бактериальных культур и бактериофагов ... 53
2. Среды для культивирования бактерий и бактериофагов 53
3. Выращивание и очистка бактериофагов 55
4. Определение титра фага 56
5. Выделение хвостов бактериофага Т4 56
6. Получение чехольного белка бактериофага Т4 в мономерном состоянии 57
7. Очистка "вил" 59
8. Комплементация in vitro 59
9. Выделение и очистка сокращенных чехлов 60
10. Электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия 61
11. Аминокислотный анализ 63
12. Аналитическое ультрацентрифугирование 63
13. Аналитическое изоэлектрофокусирование в полиакриламидном геле 64
14. Экстракция связанных с белком нуклеозидтрифосфатов 66
15. Тонкослойная хроматография 66
16. Метод кругового дихроизма 67
17. Оптическая дифракция электронномикроскопических изображений 67
18. Спектрофотометрические измерения 68
19. Метод электронной микроскопии 68
20. Определение концентрации белка 69
21. Определение общего фосфора 69
П. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
1. Выделение и очистка продукта гена 18. 70
A. Получение и очистка хвостов фага Т4 70
Б. Получение и очистка мономера пг18 75
B. Проверка биологической активности препарата чехольного белка 78
2. Физико-химические характеристики чехольного белка
A. Определение молекулярной массы пг18 78
Б. Изучение аминокислотного состава пг18 82
B. Определение изоэлектрической точки пг18 .... 82
Г. Агрегационные свойства чехольного белка фага Т4 84
3. Определение нуклеозидтрифосфата, связанного с чехоль
ным белком 93
А. Идентификация связанного нуклеотида 93
Б. Определение количественного соотношения между
пг18 и нуклеотидом 94
4. Изучение молекулярной организадии изомерных форм чехольного белка методом оптической дифракции ... 98
5. Сравнительное изучение спектральных характеристик мономера пг18 и его полимеризационных форм .... 105
А. Измерение поглощения изомерных форм чехольного белка в ультрафиолетовой области 105
Б. Изучение структурных перестроек чехольного белка при полимеризации и в процессе сокращения . . 109
ОБСУЖДЕНИЕ 123
ВЫВОДЫ 132
Принятые сокращения 134
Список литературы 135
