Введение
Обзор литературы 9
Характеристика вирусов гриппа А 9
Классификация 9
Структура вириона 10
Организация генома и функции вирусных белков 11
Жизненный цикл вируса гриппа А 14
Особенности патогенеза и клиники 22
Эпидемиология вирусов гриппа А и межвидовая трансмиссия 24
Методы определения подтипа вируса гриппа А 29
Иммунологические методы 29
Молекулярно-генетические методы 33
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) и «real-time» ПЦР 33
Изотермальная реакция транскрипционно-опосредованной амплификации нуклеиновых кислот (NASBA)
Петлевая изотермальная амплификация (LAMP) 38
Чувствительность и специфичность амплификационных методов 39
ДНК микрочипы 42
Заключение по обзору литературы 48
Материалы и методы 50
Результаты и обсуждение 57
Анализ вариабельности генов поверхностных гликопротеинов вируса гриппа А.
Выбор праймеров и олигонуклеотидных зондов 62
Разработка биологического микрочипа для определения подтипа вируса гриппа А
Структура и принципы работы биочипа 62
Оптимизация условий анализа 64
Оценка чувствительности и специфичности метода 69
Анализ штаммов ВГА, выделенных у диких и домашних птиц, на биочипе 74
Анализ штаммов ВГА, выделенных у человека, на биочипе 79
Заключение 82
Выводы 83
Благодарности 84
Библиографический список 85
