Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 14
1.1. Артериальная гипертония 14
1.1.1. Моногенные, или менделевские формы гипертонии 15
1.1.2. Полигенные формы артериальной гипертонии. Гипертоническая болезнь, или эссенциальная гипертония 16
1.1.3. Изучение гипертонии на животных моделях 17
1.1.3.1. Крысы НИСАГ 19
1.1.4. Стресс как фактор, провоцирующий развитие артериальной гипертонии 23
1.2. Физиологические системы и их роль в повышении АД 24
1.2.1. Симпатоадреналовая система и контроль артериального давления 24
1.2.2. Ренин-ангиотензин-альдостероновая система (РАС): ее роль в регуляции АД и в
ровании гипертензивного статуса 26
1.2.2.1. Регуляция циркулирующей РАС – классические пути 26
1.2.2.2. Основные компоненты РАС 27
1.2.2.2.1. Ренин 27
1.2.2.2.2. Ангиотензиноген 28
1.2.2.2.3. Ангиотензин-превращающий фермент (АСЕ) 29
1.2.2.2.4. Ang II и его рецепторы 31
1.2.2.2.5. «Новые» компоненты РАС 33
1.2.2.3. Локальные тканевые РАС 39
1.2.2.3.1. Почечная РАС 40
1.2.2.3.2. РАС в сердце 43
1.2.2.3.2.1. Функции кардиальной РАС 49
1.2.2.3.3. РАС мозга 54
1.2.2.3.3.1. Функции мозговой РАС 60
1.2.2.3.4. Адренальная РАС 67
1.2.2.3.4.1. Функции РАС в надпочечнике 70
1.2.2.3.5. Сосудистая РАС 73
1.2.2.3.5.1. Функции сосудистой РАС 76
1.2.2.3.6. Другие тканевые РАС 80
1.2.2.4. Значение внутриклеточной РАС 82
1.2.3. Циклооксигеназы и синтез простагландинов 83
1.2.3.1. Структура и клеточный синтез ПГ 84
1.2.3.2. Формы циклооксигеназ 86
1.2.3.3. Рецепторы простаноидов 88
1.2.3.4. Регуляция циклооксигеназ 88
1.2.3.4.1. Регуляция СОХ на уровне транскрипции 88
1.2.3.4.2. Регуляция циклооксигеназ на пост-транскрипционном пре-трансляционном уровне 90
1.2.3.4.3. Регуляция циклооксигеназ на пост-трансляционном уровне 91
1.2.3.5. Циклооксигеназы и простаноиды в здоровье и болезни 92
1.2.3.5.1. COX-1 и COX-2 в центральной нервной системе 92
1.2.3.5.1.1. Простагландины в ЦНС 94
1.2.3.5.1.2. Простагландины и стресс – связь с ГГАС и СНС 96
1.2.3.5.2. СОХ-2 и синтез простагландинов в надпочечниках 99
1.2.3.5.3. СОХ-2 в почках 102
1.2.3.5.3.1. Почечные эффекты простагландинов 104
1.2.3.5.4. Сердечнососудистая система и простагландины 107
1.3. Современные представления о механизмах возникновения гипертонии 111
1.3.1. Гипотеза единого пути развития эссенциальной гипертонии 113
1.4. Заключение 116
ГЛАВА 2. Материалы и методы 118
2.1.Материалы 118
2.2. Праймеры 118
2.3.Экспериментальные животные 121
2.3.1. Артериальное давление 121
2.4. Водная депривация 122
2.5. Выделение суммарной РНК из тканей 122
2.6. Получение кДНК (обратная транскрипция) 122
2.7. Определение уровней содержания мРНК 123
2.7.1. Построение калибровочных кривых при ПЦР в реальном времени 123
2.7.2. Определение относительных уровней мРНК методом ПЦР в реальном времени с применением красителя SYBR Green I 124
2.7.3. Статистическая обработка результатов 125
2.8. Выделение ДНК из печени крыс 125
2.9. Определение нуклеотидной последовательности 5’-области гена Lngfr 126
2.9.1. Полимеразная цепная реакция 126
2.9.2. Секвенирование 126
ГЛАВА 3. Результаты исследования 127
3.1. Экспрессия генов РАС у крыс WAG и НИСАГ 127
3.1.1. Уровень экспрессии генов РАС в почках 127
3.1.1.1. Экспрессия генов РАС в почках молодых (1,5 мес) крыс 127
3.1.1.2. Уровень мРНК генов РАС в почках зрелых (4 мес) крыс в покое и при водной депривации 130
3.1.2. Экспрессия генов РАС в миокарде 130
3.1.2.1. Уровень мРНК генов РАС у молодых (1,5 мес) крыс 130
3.4.2.1. Уровень мРНК генов РАС у зрелых (4 мес) крыс в покое и при водной депривации 132
3.1.3. Экспрессия генов РАС в мозговых структурах 133
3.1.3.1. Уровень мРНК генов РАС у молодых (1,5 мес) крыс 133
3.1.3.1.1. Уровень мРНК генов РАС в гипоталамусе 133
3.1.3.1.2. Уровень мРНК генов РАС в продолговатом мозге 134
3.1.3.2. Уровень мРНК генов РАС в мозге зрелых (4 мес) крыс 135
3.1.3.2.1. Уровень мРНК генов РАС в гипоталамусе в покое и при водной депривации. 135
3.4.3.2.1. Уровень мРНК генов РАС в продолговатом мозге 137
3.1.4. Экспрессия генов РАС в надпочечниках 137
3.1.4.1. Уровень мРНК генов РАС у молодых (1,5 мес) крыс 137
3.1.4.2. Уровень мРНК генов РАС у зрелых (4 мес) крыс в покое и при водной депривации 138
3.1.5. Экспрессия гена Асе в легких 139
3.2. Экспрессия гена Th у крыс линий WAG и НИСАГ в состоянии покоя и стресса
водной депривации 140
3.2.1. Уровень мРНК гена Th в надпочечниках 140
3.2.2. Уровень мРНК гена Th в мозговых структурах 141
3.3. Экспрессия гена Cох-2 у крыс линий WAG и НИСАГ в состоянии покоя и стресса
водной депривации 143
3.3.1. Уровень мРНК гена Cох-2 в почках 143
3.3.1.1. Уровень мРНК гена Cох-2 в почках молодых крыс 143
3.3.1.2. Уровень мРНК гена Cох-2 в почках взрослых крыс 143
3.3.2. Уровень мРНК гена Cох-2 в мозге 144
3.3.2.1. Уровень мРНК гена Cох-2 в гипоталамусе 144
3.3.2.2. Уровень мРНК гена Cох-2 в продолговатом мозге 145
3.3.3. Уровень мРНК гена Cох-2 в надпочечниках 146
3.4. Поиск корреляций в экспрессии изучаемых генов у молодых крыс WAG и НИСАГ
3.4.1. Корреляции в уровнях мРНК одноименных генов в разных органах 147
3.4.2. Корреляции в уровнях мРНК генов, относящихся к разным системам, внутри одного органа 148
3.4.3. Корреляции в уровнях мРНК генов разных органов и систем 149
3.5. Секвенирование кодирующего сигнальный пептид фрагмента гена Ngfr крыс линий НИСАГ и WAG 152
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов 153
4.1. Экспрессия генов ренин-ангиотензиновой системы и Сох-2 у крыс линии НИСАГ 153
4.1.1. Экспрессия генов РАС в почке 153
4.1.2. Экспрессия генов РАС в миокарде 161
4.1.3. Экспрессия генов РАС в мозге 167
4.1.4. Экспрессия генов РАС в надпочечниках 177
4.2. Экспрессия Th у крыс линии НИСАГ 180
4.3. Секвенирование кодирующего сигнальный пептид фрагмента гена Ngfr;
характеристика локуса этого гена 185
4.4. Заключение 194
Выводы 196
Список цитируемой литературы
