Введение
Глава 1. Иммуногенность генно-инженерных биологических препаратов (обзор литературы) 15
1.1. Определение генно-инженерных биологических препаратов 15
1.2. Понятие иммуногенности и причины повышенного иммунного ответа на генно-инженерные биологические препараты 19
1.3. Следствия повышенной иммуногенности биологических лекарственных средств. Связывающие и нейтрализующие антитела. 27
1.4. Подходы к выявлению связывающих и нейтрализующих антител против генно-инженерных биологических препаратов 36
Глава 2. Методология и методы исследования 41
2.1. Группы обследуемых лиц 41
2.1.1. Образцы, использовавшиеся для стандартизации методов детекции связывающих и нейтрализующих антител к препаратам интерферона-бета.. 41
2.1.2. Исследование распространенности связывающих и нейтрализующих антител к препаратам интерферона-бета у пациентов с рассеянным склерозом 41
2.1.3. Исследование распространенности связывающих антител к рекомбинантным формам эритропоэтина 42
2.1.4. Исследование распространенности связывающих антител к препаратам инфликсимаба, адалимумаба и тоцилизумаба, а также концентрации препаратов у пациентов с ревматоидным артритом 43
2.2. Лабораторные методы исследования 45
2.2.1. Метод дот-блота для выявления связывающих антител 45
2.2.2. Метод для выявления нейтрализующих антител к интерферону-бета, основанный на репортерной клеточной линии HL-116 47
2.2.3. Исследование связывающих и нейтрализующих антител к препаратам интерферона-бета 50
2.2.4. Исследование связывающих антител к рекомбинантным формам эритропоэтина 51
2.2.5. Исследование распространенности связывающих антител к препаратам инфликсимаба, адалимумаба и тоцилизумаба, а также измерение концентрации препаратов 51
2.3. Статистические методы обработки данных 52
Глава 3. Результаты исследования 53
3.1. Протокол верификации теста определения нейтрализующих антител к препаратам интерферона-бета, измеряемых с помощью гена-репортера люциферазы в клеточной линии HL-116 53
3.1.1. Оценка аналитических характеристик тест-системы. 54
3.1.2. Оценка робастности тестовой системы. 57
3.1.3. Оценка стабильности растворов 57
3.1.4. Оценка возможности интерференции различных аутоантител при измерении титра нейтрализующих антител к препаратам интерферона-бета 57
3.1.5. Оценка аналитической точности с помощью исследования смещения (В) 59
3.1.6. Верификация границ нормы 59
3.1.7. Итоги экспериментов по верификации метода. 59
3.2. Определение референтных значений для связывающих антител к генно инженерным биологическим препаратам и подтверждение специфичности реакции связывания антител, измеренных методом дот-блота 61
3.3. Связь связывающих и нейтрализующих антител к препаратам интерферона-бета 62
3.4. Влияние связывающих антител к рекомбинантным формам эритропоэтина на клинический ответ от проводимой анти-анемической терапии у пациентов с хронической болезнью почек 5 стадии, находящихся на гемодиализе 67
3.5. Влияние антител к моноклональным терапевтическим иммуноглобулинам, использующимся для лечения ревматоидного артрита, на концентрацию целевого препарата в сыворотке крови пациентов и фармакологическую эффективность генно-инженерных биологических препаратов 69
Глава 4. Обсуждение результатов 78
Заключение 91
Выводы 92
Практические рекомендации 94
Перспективы дальнейшей разработки темы 95
Список сокращений 96
Список литературы 97
