Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы
1.1. К истории открытия фермента 11
1.2. Механизм действия и структура липоксигеназы
1.2.1. Субстраты липоксигеназной реакции 13
1.2.2. Продукты липоксигеназной реакции 14
1.2.3. Свойства и структура фермента 18
1.2.4. Механизм действия 21
1.2.5. Сопряженные реакции,катализируемые липоксигенаяой 24
1.3. Гетерогенность липоксигеназных систем 26
1.4. Физиологическая роль липоксигеназы в норме и при патологических состояниях 29
1.5. Процессы перекисного окисления липидов в норме и при радиационном воздействии 33
ГЛАВА 2. Материал и методы исследования
2.1. Объект исследования и методы очистки фермента 38
2.2. Определение белка 39
2.3. Определение активности липоксигеназы 40
2.4. Аналитический диск-электрофорез в ПААГ 42
2.5. Метод изоэлектрического фокусирования 45
2.6. Аминокислотный анализ 46
2.7. Методы кругового дихроизма и УФ-спектроскопии 47
2.8. Рентгеновское облучение 48
2.9. Используемые реактивы 49
ГЛАВА 3. Липоксигеназные системы пшеницы вида triticum aestivum
3.1. Получение препаратов липоксигеназы из семян и проростков пшеницы 50
3.2. Множественные молекулярные формы липоксигеназы пшеницы 59
3.3. Изучение некоторых кинетических свойств липоксигеназы пшеницы 65
3.3.1. Зависимость активности липоксигеназы от рН 68
3.3.2. Зависимость активности липоксигеназы от концентрации фермента 70
3.3.3. Субстратная специфичность липоксигеназы пшеницы 72
3.3.4. Зависимость активности липоксигеназы от времени реакции и от концентрации гидроперекисей в реакционной среде 75
3.3.5. Зависимость активности липоксигеназы от температуры78
3.3.6. Определение молекулярной массы липоксигеназы пшеницы 78
ГЛАВА 4. Действие рентгеновского излучения на липоксигеназные системы пшеницы вида triticum aestivum .
4.1. Изменение активности липоксигеназы после облучения in vivo и in vitro 82
4.1.1. Облучение in vivo 83
4.1.2. Облучение in vitro 85
4.2. Влияние рентгеновского излучения на состав молекулярных форм липоксигеназы пшеницы 87
4.3.Изучение аминокислотного состава липоксигеназы 93
4.4. Изучение вторичной структуры липоксигеназы 99
Заключение 104
Выводы 108
Литература iii
