Введение
2. Обзор литературы 11
2.1. H2S как эндогенный посредник 11
2.1.1. Физико-химические свойства H2S 11
2.1.2. Эндогенные концентрации H2S. Баланс между токсическими и физиологическими эффектами 12
2.1.3. Синтез и катаболизм H2S 15
2.2. Некоторые физиологические эффекты и мишени действия H2S в возбудимых тканях 18
2.3. Роль H2S в регуляции эндокринной системы 22
2.4.GH3 клетки как модель для изучения мишеней действия H2S в эндокринных клетках 26
2.5.Са2+ активируемые К каналы как мишень действия H2S 29
2.6.АТФ-зависимые К каналы (К(АТФ) каналы) как мишень действия H2S 30
2.7.Роль H2S в ноцицепции 32
2.8.Нейроны тройничного ганглия как модель для изучения клеточных механизмов ноцицепции 34
2.9.TRP рецепторы 35
2.9.1. TRPV1 рецепторы и модуляция их активности H2S 36
2.9.2. TRPA1 рецепторы и H2S 40
3. Материалы и методы 44
3.1.Культура клеток 44
3.1.1. Вторичная культура клеток 44
3.1.2. Первичная культура нейронов 45
3.2.Электрофизиологические методы исследования 46
3.2.1. Выделение и регистрация активности тригеминального нерва 46
3.2.2. Регистрация токов и потенциалов в нейронах 47
3.3.Флуоресцентные методы 49
3.4.Статистический анализ 52
4. Результаты собственных исследований 53
4.1.Влияние H2S на возбудимость GH3 клеток гипофиза крысы 53
4.1.1. Эффекты NaHS на мембранный потенциал GH3 клеток 53
4.1.2. Влияние NaHS на амплитуду К(АТФ) токов 58
4.1.3. Влияние NaHS на Са2+ осцилляции в GH3 клетках 60
4.1.4. Влияние NaHS на экзоцитоз секреторных гранул, содержащих гормон роста и пролактин, в GH3 клетках 62
4.1.5. Влияние блокаторов Са2+-активируемых К каналов и К(АТФ) каналов на процессы базального и вызванного экзоцитоза 65
4.2.Влияние NaHS на спайкование тригеминального нерва и возбудимость нейронов тригеминального ганглия 66
4.2.1. Эффекты NaHS на электрическую активность тригеминального нерва 67
4.2.2. Влияние NaHS на мембранный потенциал и выходящие калиевые токи в нейронах тригеминального ганглия 68
4.2.3. Влияние NaHS на TRPV1 токи в тригеминальных нейронах 70
4.2.4. Влияние NaHS на внутриклеточную концентрацию ионов Ca2+ в изолированных тригеминальных нейронах 73
5. Обсуждение результатов 76
5.1. H2S вызывает гиперполяризацию, угнетение Са2+ осцилляций и экзоцитоза секреторных гранул в культуре GH3 клеток гипофиза крысы 77
5.3. H2S модулирует возбудимость ноцицептивных тригеминальных нейронов крысы 83
Выводы 89
Список литературы 90
