Введение
Глава I. Литературный обзор 9
1. Механизмы нейродегенеративных процессов и роль митохондрий в них 9
1.1. Биомолекулярные основы болезни Альцгеймера 10
1.2. Роль митохондрий в патогенезе болезни Альцгеймера 19
1.2.1. Нарушение работы дыхательной цепи и продукция свободных радикалов как патогенетический фактор нейродегенеративных заболеваний 19
1.2.2. Накопление амилоида митохондриями 24
1.2.3. Открытие поры скачка митохондриальной проницаемости 25
1.2.4. Роль митохондрий в регуляции кальциевого гомеостаза клетки 34
1.3. Митохондрии как мишень терапии нейродегенеративных заболеваний 36
1.3.1. Модуляторы кальциевого гомеостаза клетки и митохондрий 36
1.3.2. Митохондриально-направленные соединения 38
1.3.3. Ингибиторы СМП 40
1.3.4. Димебон и его аналоги 41
Глава II. Материалы и методы 45
2.1. Приготовление гомогената мозга крыс 46
2.2. Выделение субклеточных фракций полушарий головного мозга крыс 46
2.3. Выделение митохондрий печени крыс 47
2.4. Определение белка в препаратах митохондрий при помощи микробиуретового метода 48
2.5. Определение трансмембранного потенциала митохондрий 48
2.6. Исследование скачка митохондриальной проницаемости 49
2.7. Скачок митохондриальной проницаемости энергизованных митохондрий 50
2.8. Скачок митохондриальной проницаемости деэнергизованных митохондрий 50
2.9. Исследование накопления кальция митохондриями и кальциевой мкости митохондрий мозга 50
2.10. Исследование конформационных переходов ANT. 51
2.11. Исследование образования АФК митохондриями 52
2.12. Определение интенсивности перекисного окисления липидов 53
2.13. Определение цитотоксичности и цитопротекторных свойств тетрагидро--
карболинов на первичных культурах нейронов крысят 53
2.14. Исследование процессов распределения в несмешивающихся средах 55
Глава III. Результаты и их обсуждение 56
3.1. Исследование действия димебона на митохондрии 56
3.1.1. Действие димебона на скачок митохондриальной проницаемости энергизованных митохондрий 56
3.1.2. Действие димебона на скачок митохондриальной проницаемости деэнергизованных митохондрий 58
3.1.3. Влияние АДФ на ингибирование СМП димебоном 60
3.1.4. Переносчик адениновых нуклеотидов как вероятная мишень действия димебона 61
3.1.5. Влияние димебона на кальциевый гомеостаз митохондрий 65
3.1.6. Исследование действия димебона на кальциевую мкость митохондрий в моделях болезни Альцгеймера 72
3.1.7. Влияние димебона на перекисное окисление липидов гомогената мозга крыс 75
3.2. Поиск потенциальных нейропротекторов в ряду структурных аналогов
димебона 80
3.2.1. Разработка системы методов скрининга аналогов димебона 82
3.2.2. Скрининг биологической активности модифицированных пропионамидными фрагментами тетрагидро--карболинов 84
3.2.3. Скрининг биологической активности N-замещенных-тетрагидро--карболинов, содержащих пептидные остатки 88
3.2.4. Скрининг биологической активности фторсодержащих тетрагидро--карболинов 91
3.2.5. Влияние молекулярной структуры монофторированных аналогов димебона на свойства распределения в системе октанол/буфер 98
Выводы 101
Список литературы 102
