Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1.1. Сериновые протеазы. Структура. Механизм реакционного действия 12
1.2. Модификация структуры и активности сериновых протеаз низкомолекулярными лигандами и свойствами микроокружения 20
1.3. Супрамолекулярные системы на основе амфифильных соединений
1.3.1. Поверхностно-активные вещества (ПАВ) 26
1.3.2. Мицеллярные растворы 30
1.3.3. Микроэмульсии 32
1.3.4. Солюбилизация 35
1.4. Свойства сериновых протеаз в супрамолекулярных системах на основе амфифильных соединений 37
1.5. Постановка цели исследования 41
ГЛАВА 2. Объекты и методы исследования 42
2.1. Объекты исследования 42
2.1.1. Ферменты, субстраты 42
2.1.2. Амфифильные соединения
2.2. Приготовление растворов 46
2.3. Кинетические измерения 47
2.4. ЯМР-самодиффузия 53
2.5. Флуоресцентная спектроскопия 53
2.6. ИК-спектроскопия 54
2.7. Динамическое светорассеяние 54
2.8. Молекулярный докинг 55
2.9. Исследование солюбилизационной емкости растворов ПАВ 56
2.10. Статистическая обработка данных 56
ГЛАВА 3. Структура и активность сериновых протеаз в микроэмульсионных средах 57
3.1. Влияние алифатических спиртов на каталитическую активность трипсина в среде обращенных мицелл 57
3.2. Влияние заряда межфазной поверхности на структуру и активность трипсина и -химотрипсина в обращенных мицеллах 66
ГЛАВА 4. Структура и свойства сериновых протеаз в водных растворах геминальных ПАВ 74
4.1. Свойства растворов геминальных ПАВ как среды для ферментативных реакций 74
4.2. Структура и каталитическая активность трипсина и -химотрипсина в растворах геминальных ПАВ с метильными заместителями в головных группах 79
4.3. Структура и каталитическая активность трипсина и -химотрипсина в растворах гидроксилсодержащих геминальных ПАВ 96
4.4. Анализ комплексообразования мономеров геминальных ПАВ с трипсином и -химотрипсином методом молекулярного докинга 107
ГЛАВА 5. Механизмы регуляции активности сериновых протеаз амфифильными алкилоксибензолами 112
5.1. Влияние амфифильных алкилоксибензолов на каталитическую активность и структуру трипсина и -химотрипсина 112
5.2. Анализ комплексообразования алкилоксибензолов с трипсином и -химотрипсином методом молекулярного докинга 118
Заключение 121
Выводы 124
Список литературы
