Введение
II. Обзор литературы 8
2.1 Мигрирующие генетичеокие элементы прокариот 8
2.1.1 Определение и классификация мигрирующих генетических элементов. 8
2.1.2 Структурная и функциональная организация is- последовательностей. Ю
2.1.3 Сложные транспозоны. 13
2.1.4 Транспозон ТпЗ и родственные ему транспозоны 14
2.1.5 Мигрирующие бактериофаги I?
2.1.6 Эффекты, вызываемые мигрирующими элементами в реципиентной ДНК: регуляция действия генов 18
2.1.7 Перестройки,индуцируемые мигрирующими элементами в реципиентной ДНК 20
2.1.8 Эксцизия мигрирующих элементов 24
2.1.9 Образование коинтегратов мигрирующими элементами 28
2.1.10 Обратная транспозиция 29
2.1.11 Специфичность транспозиции мигрирующих элементов 30
2.1.12 Мутации хозяйского генома, влияющие на события "незаконной" рекомбинации, ассоциированные с мигрирующими элементами 32
2.1.13 Модели транспозиции .35
2.2 Генетический анализ у фотосинтезирующих пурпурных бактерий 39
III. Материалы и методы 46
3.1 Бактериальные штаммы 46
3.2 Плазмиды и бактериофаги 46
3.3 Среды и реактивы 46
3.4 Конъюгационные скрещивания 49
3.5 Определение частоты транспозиции 50
3.6 Иммунность к колицину EI 50
3.7 Несовместимость автономных плазмид 50
3.8 Получение спонтанных &й3-вариантов плазмиды PAS8-I2I 51
3.9 Мутагенез 51
3.10 Ампициллиновое обогащение .51
ЗДІ Поиск ауксотрофов, индуцированных внедрением транспозона ад и плазмид pAS8-l2i/pAS8-i2I3/. 51
3.12 Выделение плазмидной ДНК 52
3.13 Выделение ДНК фага 53
3.14 Обработка препаратов ДНК эндонуклеазами рестрикции .53
3.15 Электрофоретический анализ препаратов ДНК 53
3.16 Определение молекулярного веса фрагментов линейной ДНК . 54
ІV. Экспериментальные результаты 58
4.1 Миграция транспозона ад с плазмиды pAS8-i2i в геном Eh. sphaeroides 2R 58
4.2 Локализация включений транспозона ад в геноме Eh. sphaeroides 2Е 64
4.3 Включение транспозона ад в геномы штаммов 28-5, 2.4.1.,ES6$0 Eh.sphaeroides 67
4.4 Получение плазмиды pAS8-i2i::Tn5 и её Стр. введение в пурпурную бактерию .71
4.5 Конъюгативная передача плазмид штаммами 2R::pAS8-I2I И 2Е: :pAS8-I2I^ . 77
4.6 Вторичные перестройки хромосомы, обусловленные транспозоном Тп? и плазмидой pAS8-i2i 81
4.7 Экспрессия несовместимости штаммами 2E::pAS8-i2i 83
4.8 Формирование в» плазмид в межродовом скрещивании Eh.sphaeroides 2R:spAS8-I2I с
E.coli HBIOI 90
4.9 Участие транспозона Тп7в наследовании плазмиды PAS8-I2I в Eh. sphaeroides 2Е 99
4.10 Экспрессия свойств транспозоном ЯпАв Rh. sphaeroides 2R 102
4.11 Наследование плазмиды pAS8-i2l и её производных в штаммах 2Е::Тп7 105
V. Обсуждение результатов .108
5.1 Свойства транспозона ЗДв штаммахHh.sphaeroides .108
5.2 Природа штаммов 2R::pAS8-i2i 114
5.3 Происхождение Е1 плазмид, обнаруженных в межродовых скрещиваниях 121
5.4 Экспрессия Р несовместимости штаммами 2Rs:pAS8-I2I 124
5.5 Свойства транспозона Тп5 в Rh.sphaeroides 2R 125
Заключение 128
Выводы 130
Литература
