Введение
1 Обзор литературы: известные модельные биосистемы для изучения защитной эффективности препаратов от инфекций человека, вызванных вирусами оспы обезьян и гриппа птиц А/H5N1 17
1.1 История выделения патогенных для человека вирусов оспы обезьян и гриппа птиц 17
1.2 Чувствительность человека, подопытных животных и их первичных клеточных культур к вирусу оспы обезьян и высокопатогенному вирусу гриппа птиц А/H5N1
1.2.1 Чувствительность человека и животных и их первичных клеточных культур к вирусу оспы обезьян 19
1.2.2 Чувствительность человека и мышей и их первичных клеточных культур к вирусу гриппа птиц 31
1.3 Распространение вируса оспы обезьян и высокопатогенного вируса гриппа птиц А/H5N1 в организме человека и подопытных животных 37
1.3.1 Накопление вируса оспы обезьян в органах и тканях человека и животных 37
1.3.2 Накопление вируса гриппа птиц в органах и тканях человека и мышей 47
1.4 Патоморфологические изменения у человека и подопытных животных, инфицированных вирусом оспы обезьян и высокопатогенным вирусом гриппа птиц А/H5N1 51
1.4.1 Данные световой и электронной микроскопии органов и тканей человека и животных, инфицированных возбудителем оспы обезьян 51
1.4.2 Данные световой и электронной микроскопии органов и тканей человека и мышей, инфицированных вирусом гриппа птиц... 53
1.5 Использование модельных видов животных для оспы обезьян и гриппа
птиц (А/H5N1) при изучении эффективности противовирусных препаратов 57
1.6 Подходы к созданию модельных биосистем для изучения защитной эффективности противооспенных и противогриппозных препаратов у человека 66
1.7 Заключение 71
2 Материалы и методы 73
2.1 Лабораторные животные 73
2.2 Перевиваемая клеточная культура и куриные эмбрионы 74
2.3 Первичные культуры клеток крови и легких человека 74
2.4 Первичные культуры клеток подопытных видов животных 77
2.5 Вирусы 79
2.6 Методы инфицирования животных 80
2.7 Методы изучения инфекционного процесса в первичных клеточных культурах 85
2.8 Подготовка биоматериалов от инфицированных животных 88
2.9 Вирусологический и молекулярно-генетический анализ проб 91
2.10 Оценка остаточной инфекционности кусочков органов сурков, зараженных вирусом оспы обезьян 92
2.11 Оценка титров противооспенных антител 92
2.12 Патоморфологические исследования 93
2.13 Исследуемые противовирусные препараты 94
2.14 Определение цитотоксичности и антиортопоксвирусной активности химических препаратов 94
2.15 Схемы применения препаратов у инфицированных вирусами сурков и мышей 95
2.16 Экстраполяция на человека и животных 50 %-х инфицирующих доз вируса, полученных с использованием первичных культур клеток. 98
2.17 Статистическая обработка результатов 98
Результаты и обсуждение 100
3 Стратегия поиска модельных биосистем для изучения защитной эффективности препаратов от инфекций человека, вызванных вирусами оспы обезьян и гриппа птиц а/h5n1 100
4 Поиск модельных видов животных для оспы обезьян по изучению защитной эффективности препаратов для человека 106
4.1 Экспериментальная и прогнозная оценка чувствительности людей и под опытных животных к патогенным ортопоксвирусам 106
4.1.1 Оценка чувствительности первичных клеток-мишеней животных и человека к патогенным ортопоксвирусам 106
4.1.1.1 Данные по чувствительности первичных клеток-мишеней животных к возбудителю оспы обезьян 106
4.1.1.2 Данные по чувствительности первичных клеток-мишеней человека и животных к возбудителю натуральной оспы
4.1.2 Оценка 50 %-х инфицирующих доз вируса оспы обезьян для подопытных животных при интраназальном заражении 124
4.1.3 Прогнозная оценка чувствительности к патогенным ортопоксвирусам человека и подопытных животных .
4.1.3.1 Прогнозная оценка 50 %-х инфицирующих доз патогенных ортопоксвиру-сов для человека и подопытных животных по данным заражения первичных их клеток-мишеней и самих животных 135
4.1.3.2 Прогнозная оценка 50 %-й инфицирующей дозы возбудителя оспы обезьян для человека 144
4.2 Распространение возбудителя оспы обезьян в организме степных сурков и аутбредных мышей ICR 149
4.2.1 Диссеминация вируса в организме сурков 149
4.2.2 Диссеминация вируса в организме мышей 157
4.3 Патоморфологические изменения у степных сурков и аутбредных мышей ICR, зараженных возбудителем оспы обезьян 164
4.3.1 Световая и электронная микроскопия органов и тканей сурков, зараженных вирусом 163
4.3.2 Световая и электронная микроскопия органов и тканей мышей, зараженных вирусом 171
4.4 Оценка возможность использования степных сурков и аутбредных мышей ICR для изучения эффективности препаратов от оспы обезьян у человека 179
4.5 Испытание и пределы практического применения модельных биосистем для оспы обезьян на основе степного сурка и аутбредной мыши ICR 192
5 Поиск модельной биосистемы для изучения защитной эффективности препаратов от гриппа птиц (а/h5n1) у человека 205
5.1 Чувствительность человека и подопытных животных к высокопатогенному вирусу гриппа птиц А/H5N1... 205
5.1.1 Прогнозная оценка 50 %-й инфицирующей дозы вируса для человека по данным заражения его первичных клеток-мишеней 205
5.1.2 Оценка 50 %-х инфицирующих доз вируса для подопытных животных при респираторном заражении 214
5.2 Диссеминация высокопатогенного вируса гриппа птиц А/H5N1 в организ ме кур генетической линии Род-Айланд, гусей генетической линии A. anser и аутбредных мышей ICR 223
5.2.1 Распространение вируса в организме кур и гусей 223
5.2.2 Распространение вируса в организме мышей 2 5.3 Патоморфологические изменения у аутбредных мышей ICR, инфицированных высокопатогенным вирусом гриппа птиц А/H5N1.. 243
5.4 Оценка возможности применения модельной биосистемы «аутбредная мышь ICR –штамм A/Chicken/Kurgan/05/2005 высокопатогенного вируса гриппа птиц А/H5N1» для изучения защитной эффективности препаратов у человека 252
5.5 Испытание и пределы практического применения модельной биосистемы для гриппа птиц А/H5N1 на основе аутбредной мыши ICR 261
Заключение 268
Список сокращений и условных обозначений 278
Список литературы
