Введение
1. Общая характеристика работы 4
1.1. Актуальность 4
1.2. Цель и задачи исследования 7
1.3. Научная новизна работы 7
1.4. Апробация работы 8
1.5. Публикации 9
1.6. Структура и объем диссертации 9
2. Обзор литературы 10
2.1. Хроматин и эпигенетика 10
2.1.1. Эпигенетическая регуляция экспрессии генов 10
2.1.2. Состав и структура хроматина 11
2.1.3. Ковалентные модификации гистонов 14
2.1.4. Эпигенетическое наследование структуры хроматина . 15
2.2. Гетерохроматин 19
2.2.1. Общая характеристика и функции гетерохроматина 19
2.2.2. Гетерохроматиновый белок HP1 21
2.2.3. Формирование и поддержание структуры гетерохроматина..23
2.2.4. Гетерохроматин и транскрипция 26
2.3. Мозаичный эффект положения гена 31
2.3.1. Феномен мозаичного эффекта положения 31
2.3.2. Факторы, влияющие на эффект положения 33
2.3.3. Распространение эффекта положения 38
2.3.4. Транс-эффект положения 40
3. Материалы и методы исследования 46
3.1. Объекты исследования 46
3.2. Выделение РНК 46
3.3. Обратная транскрипция 47
3.4. Количественная полимеразная цепная реакция
3.5. Высокопроизводительное секвенирование РНК 49
3.6. Иммунопреципитация хроматина 50
3.7. Флуоресцентная гибридизация in situ и иммуноокрашивание 52
3.8. Сайт-направленный трансгенез 54
4. Результаты 56
4.1. Изменения транскрипции генов из района инверсии у взрослых мух и личинок 56
4.2. Анализ содержания белка HP1a в хроматине генов, демонстрирующих изменения транскрипции 60
4.3. Изменение транскрипции генов под влиянием цис-эффекта положения у куколок разных возрастов 61
4.4. Изменение расположения транс-инактивируемого и неинактивируемого участков гомологичной хромосомы в пространстве ядра под влиянием инверсии 63
4.5. Содержание гетерохроматинового белка HP1a в составе хроматина репортерных трансгенов в транс-инактивируемом районе 67
4.6. Влияние энхансера на транс-инактивацию репортерного трансгена 71
5. Обсуждение 75
6. Выводы 80
7. Список цитируемой литературы
