Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1. Детерминанты вирулентности бактерий рода Bordetella
1.1.1. Регуляция вирулентности бактерий рода Bordetella
1.1.2. Факторы вирулентности бактерий рода Bordetella
1.2. Вакцинопрофилактика коклюша и распространенность бактерий Bordetella pertussis с мутациями в генах основных факторов вирулентности
1.3. Иммунитет к бактериям Bordetella pertussis при заболевании и вакцинации
1.3.1. Гуморальный иммунный ответ к бактериям Bordetella pertussis
1.3.2. Клеточно-опосредованный иммунный ответ к бактериям Bordetella pertussis
1.4. Молекулярно-генетические подходы к созданию новых препаратов для профилактики коклюша
ГЛАВА 2. Собственные исследования
2.1. Материалы и методы
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Разработка методической базы для молекулярно-генетической модификации бактерий рода Bordetella
2.2.1.1. Отбор реципиентных бактерий рода Bordetella для конструирования рекомбинантных бактерий B.pertussis. Отработка условий конъюгации для передачи рекомбинантных плазмид в клетки бактерий рода Bordetella
2.2.1.2. Конструирование плазмид широкого круга хозяев, содержащих природный и мутантный оперон ptx
2.2.1.3. Конструирование рекомбинантных бактерий B.bronchiseptica и B.pertussis, содержащих нативный и мутантный оперон ptx в составе плазмид
2.2.1.4. Конструирование плазмид не способных реплицироваться в бактериях рода Bordetella и содержащих мутантный оперон ptx
2.2.1.5. Конструирование плазмид не способных реплицироваться в бактериях рода Bordetella и содержащих мутантный фрагмент гена dnt
2.2.2. Конструирование рекомбинантных аттенуированных бактерий B.pertussis, содержащих мутантную форму оперона ptx и нокаутнуюмутацию в гене dnt генома B.pertussis
2.2.2.1. Конструирование рекомбинантных аттенуированных бактерий B.pertussis, содержащих мутантную форму оперона ptx в геноме B.pertussis
2.2.2.2. Конструирование рекомбинантных аттенуированных бактерий B.pertussis, содержащих мутантную форму оперона ptxP1 и нокаутную мутацию в гене dnt бактерий B.pertussis 4М
2.2.2.3. Конструирование рекомбинантных аттенуированных бактерий B.pertussis, содержащих нокаутную мутацию в гене dnt и ptxP3 мутантного оперона ptx
2.2.3. Иммунобиологическая характеристика сконструированных бактерий B.pertussis
2.2.3.1. Изучение стабильности молекулярной структуры и характеристик рекомбинантных аттенуированных бактерий B.pertussis 4М и B.pertussis 4МKS после 15 пересевов на искусственной питательной среде и пяти пассажей в легких мышей
2.2.3.2. Защитные свойства рекомбинантных аттенуированных бактерий B.pertussis
2.2.3.3. Характеристика токсичности и безопасности кандидатной рекомбинантной живой коклюшной вакцины интраназального применения в экспериментах с лабораторными животными
2.2.4. Разработка нового теста определения защитной активности коклюшных вакцин
2.2.5. Разработка препарата кандидатной рекомбинантной цельноклеточной коклюшной вакцины на основе инактивированных аттенуированных бактерий B.pertussis 4М генотипа ptxP1
2.2.6. Возможности применения сконструированных рекомбинантных бактерий B.pertussis
Заключение
Выводы
Список литературы
