Введение
Глава I. Обзор литературы 10
1.1. ДНК-маркеры и их практическое использование 10
1.1.1. RFLP-маркеры 12
1.1.2. STS-маркеры 13
1.1.3. RAPD-маркеры 14
1.1.4. AFLP-маркеры 16
1.1.5. SSR-маркеры 17
1.1.6. ISSR-маркеры 24
I.1.7.RGA -маркеры 25
1.1.8. QTL-маркеры 30
1.2. Характеристика культуры: огурец (Cucumis sativus h.) 31
1.2.1. Краткая ботаническая характеристика 33
1.2.2. Хозяйственное значение 34
1.3. Молекулярно-генетическая характеристика генома огурца 36
1.3.1. Геномный состав и кариотип 36
1.3.2. Молекулярное маркирование 37
1.4. Роль гибридов F1 в селекции огурца. 38
1.5. Настоящая мучнистая роса огурца 42
1.5.1. Возбудители болезни 43
1.5.2. Генетика устойчивости к настоящей мучнистой росе 46
Глава II. Материалы и методы 49
II.1. Растительный материал 49
II.2. Методы исследований 49
II.2.1. Выделение ДНК из растительного материала 49
II.2.2. ПЦР-анализ 51
II.2.3. Клонирование ПЦР-продуктов 57
II.2.4. Секвенирование 57
II.2.5. Анализ нуклеотидных последовательностей 57
II.2.6. Анализ расщепления 57
II.2.7. Определение гриба-возбудителя 57
Глава III. Результаты и обсуждение 58
III.1. Изучение полиморфизма генома огурца посевного (Cucumis sativus L) с использованием ISSR-метода 58
III.2.Использование RGA-праймеров для маркировании признака устойчивости к настоящей мучнистой росе 64
III.2.1. Анализ расщепления популяции F2 64
III.2.2. Идентификация возбудителя мучнистой росы 65
III.2.3. Адаптация метода RGA-ПЦР для анализа генома огурца 67
III.2.4. Анализ RGA-ПЦР 70
III.3. Оценка эффективности SSR- и STS-маркеров, ассоциированных с QTL устойчивости к мучнистой росе на расщепляющейся популяции F2 и иогенных линиях 75
III.4. Разработка эффективной системы оценки уровня гибридности гибридов F1 на основе SSR-маркеров. 80
III.4.1. Поиск надежного экспресс-метода выделения ДНК 83
III.4.2. Оптимизация условий амплификации SSR-ПЦР 85
III.4.3. Анализ SSR -ПЦР 86
Выводы 91
Список использованной литературы 92
