СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ ........................................................................................5
ВВЕДЕНИЕ.........................................................................................................................................6
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...................................................................................................12
1.1 Искусственные рецепторные системы ......................................................................................... 13
1.2 Молекулярно импринтированные полимеры.............................................................................. 14
1.2.1 Полианилин в молекулярном импринтинге .....................................................................15
1.2.2 Метод электроспиннинга в молекулярном импринтинге ...............................................21
1.3 Белковые молекулы как рецепторные элементы........................................................................ 24
1.3.1 Импринтированные белки .................................................................................................26
1.3.2 Влияние молекул шаблона на конформационные изменения белков............................28
1.3.3 Стабилизация конформационных изменений..................................................................29
1.3.4 Очистка импринтированного белка от молекул шаблона...............................................30
1.3.5 Аналитическое применение импринтированных белков................................................31
ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ ..............................................................................36
2.1 Оборудование и материалы............................................................................................................. 36
2.2 Методики и реагенты........................................................................................................................ 40
2.2.1 Получение МИП ПАНИ..................................................................................................40
2.2.2 Методика определения ПХ с использованием ПАНИ МИП .......................................42
2.2.3 Оценка селективности извлечения ПХ на ПАНИ МИП ..............................................43
2.2.4 Получение эпМИП ..........................................................................................................44
2.2.5 Методика определения ПХ с использованием ПУ и ПВП эпМИП ............................47
2.2.6 Проверка селективности извлечения ПХ на эпМИП ...................................................47
2.2.7 Получение ИБ ..................................................................................................................48
2.2.8 Синтез сорбента на основе HЧ SiO2, модифицированных ИБ....................................51
2.2.9 Методика синтеза коньюгатов для анализа с применением ИБ..................................52
2.2.10 Методика определения ЗЕА на основе импринтированных БСА и ГО.....................53
2.1.11. Проверка селективности ИБ...........................................................................................55
2.1.12. Методика определения Овальбумина с использованием анти-Овальбумин ИБ........56
2.1.13. Пробоподготовка образцов .............................................................................................57
4
2.1.14. Расчет аналитических характеристик............................................................................58
ГЛАВА 3. БИОИМПРИНТИГ ПЕРОКСИДАЗЫ ХРЕНА В ПОЛИАНИЛИНЕ НА
ПОВЕРХНОСТИ МУЛЬТИКАПИЛЯРОВ.....................................................................................59
3.1 Синтез ПАНИ МИП.......................................................................................................................... 60
3.1.1 Удерживающий слой ПАНИ..............................................................................................61
3.1.2 Получение ПАНИ МИП.....................................................................................................63
3.2 Аналитические характеристики ПАНИ МИП............................................................................ 69
ГЛАВА 4. БИОИМПРИНТИГ ПЕРОКСИДАЗЫ ХРЕНА В МАТЕРИАЛАХ ПОЛИУРЕТАНА
И ПОЛИВИНИЛПИРРОЛИДОНА, ПОЛУЧЕННЫХ МЕТОДОМ ЭЛЕКТРОСПИННИГА ....74
4.1 Получение молекулярно импринтированных материалов на основе ПУ и ПВП,
полученных методом электроспиннига ...................................................................................... 75
4.1.1 Получение материала из полиуретана ...........................................................................76
4.1.2 Получение материала из ПВП........................................................................................81
4.2 Аналитические характеристики молекулярно импринтированных материалов,
полученных методом электроспиннига ПУ типа D4 и ПВП.................................................. 83
ГЛАВА 5. ИМПРИНТИНГ БЕЛКОВЫХ МОЛЕКУЛ...................................................................92
5.1. Молекулы шаблоны ......................................................................................................................... 93
5.2 Импринтинг белков........................................................................................................................... 94
5.2.1 Выбор матричной белковой молекулы ..........................................................................95
5.2.2 Влияние концентрации молекулы шаблона при получении ИБ..................................99
5.2.4 Выбор метода получения ..............................................................................................106
5.3 Аналитические характеристики ИБ, специфичных к ЗЕА .................................................... 109
5.3.2 Импринтированный овальбумин..................................................................................114
5.3.2 Импринтированная ГО..................................................................................................117
5.4 Аналитические характеристики ИБ, специфичных к высокомолекулярным молекулам
шаблонам.......................................................................................................................................... 119
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ..............................................................................................................................125
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ......................................................................127
