Введение
Обзор литературы 9
1.Бактерия Aeromonas hydrophila и ее свойства .9
2.Иммунная система человека и инфекционные процессы .23
3. Роль различных звеньев иммунитета в развитии иммунного ответа на инфицирование бактериальным агентом 27
4.Гранулематозное воспаление как морфологический субстрат инфекционных заболеваний .30
5.Патоморфология инфекционного процесса, вызванного A. hydrophila 34
Материалы и методы .38
1. Общая характеристика материала 38
2. Методы исследования .38
2.1. Микробиологические методы .38
2.1.1. Выделение культуры бактерий A.hydrophila из медицинской пиявки .39
2.1.2. Идентификация бактерий 39
2.1.3.Исследование степени полиморфизма бактерий в популяции при подготовке инфицирующей суспензии 40
2.1.4. Определение ДНК-азной активности бактерий .41
2.1.5. Исследование чувствительности исследуемых штаммов к препаратам противомикробного действия .41
2.1.6. Исследование вирулентных свойств бактерий методом биопробы .42
2.1.7. Заражение животных для морфологических исследований .42
2. 2. Молекулярно-генетические методы .43
2.2.1. Выделение и очистка плазмидной ДНК 43
2.2.2. Электрофорез ДНК 43
2.2.3. Полимеразная цепная реакция .44
2.3. Иммунологические методы 44
2.3.1. Определение продукции термолабильного токсина у A.hydrophila 342-2 .44
2.4. Культуральные методы .45
2.4.1.Исследование вирулентных свойств бактерий A. hydrophila в отношении культуры энтероцитов человека Caco-2 .45
2.4.1.1. Культивирование клеток культуры Caco-2 45
2.4.1.2.Исследования повреждающего действия бактериальной суспензии 45
2.5. Гистологические методы .46
2.6.Гистохимические методы 46
2.7.Бактериоскопические методы 46
2.8.Морфометрические методы .46
2.9.Гематологические методы .46
2.10. Статистические методы .46
3. Обоснование выбора модели исследования и условий эксперимента 47
3.1. Выбор штамма возбудителя .47
3.2. Выбор условий культивирования возбудителя 47
3.3. Выбор способа инфицирования животных 48
3.4. Выбор инфицирующей дозы .49
3.5. Выбор режима исследования .49
3.6. Выбор экспериментальных животных 49
Результаты собственных исследований .51
1. Выделение, идентификация и сравнительная оценка вирулентных свойств различных штаммов A. hydrophila 51
1.1. Выделение и идентификация бактерий .51
1.2. Исследование степени полиморфизма бактерий в популяции при подготовке инфицирующей суспензии 53
1.3. Оценка вирулентных свойств различных штаммов A. hydrophila .55
1.3.1.Оценка вирулентных свойств бактерии A. hydrophila методом постановки биопробы на белых беспородных мышах .55
1.3.2.Исследование ферментативной активности ДНК-азы различных штаммов A.hydrophila 56
1.3.3. Исследование чувствительности исследуемых штаммов к препаратам противомикробного действия 57
1.3.4. Исследование генома бактерий A. hydrophila методом электрофореза в агарозном геле и визуализация плазмидной ДНК 59
1.3.5. Определение продукции факторов вирулентности у бактерии A.hydrophila 342-2.. 59
1.3.6. Исследование повреждающего действие бактерий A. hydrophila 342-2 на культуру энтероцитов кишечника человека Сасо-2 .59
2. Морфологические изменения органов белых беспородных мышей, вызванные подкожным введением бактерии A. hydrophila 342-2 .60
2.1. Результаты микробиологических исследований .62
2.2. Результаты морфологических исследований 63
2.2.1.Морфологические изменения внутренних органов белых беспородных мышей при подкожном инфицировании A. hydrophila 342-2 .63
2.2.2. Морфологические изменения органов иммунной системы белых беспородных мышей при подкожном инфицировании A.hydrophila 342-2 67
3. Морфологические изменения внутренних органов и иммунной системы мышей линий Balb/C и C57Bl/6 при подкожном инфицировании A. hydrophila 342-2 74
3.1.Результаты микробиологических исследований 74
3.2. Динамика лейкоцитарной реакции у мышей линий Balb/C и C57/Bl6 76
3.3. Результаты морфологических исследований .77
3.3.1.Исследование морфологических изменений внутренних органов мышей Balb/C и C57/Bl6 при подкожном инфицировании A. hydrophila 342-2 77
3.3.2. Морфофункциональные изменения органов иммунной системы мышей Balb/C и C57/Bl6 при подкожном инфицировании A. hydrophila 342-2 87
3.3.2.1. Морфологическая и морфометрическая характеристика тимуса мышей контрольных и экспериментальных групп линий Balb/C и C57/Bl6 при подкожном инфицировании A.hydrophila 87
3.3.2.2.Морфологическая и морфометрическая характеристика селезенки мышей контрольных и экспериментальных групп линий Balb/C и C57/Bl6 при подкожном инфицировании A.hydrophila 342-2 100
3.3.2.3.Морфологическая характеристика регионарных лимфатических узлов мышей контрольных и экспериментальных групп линий Balb/C и C5Bl/6 при подкожном инфицировании A.hydrophila 342-2 109
Обсуждение полученных результатов .119
Выводы .133
Список цитируемой литературы
