Введение
Глава 1. Введение 4
Глава 2. Обзор литературы 11
2.1. Кратковременная и долговременная память 11
2.2. Роль глии в синаптической передаче и пластичности 12
2.3. Долговременная потенциация и пластические процессы в нейронных сетях 15
2.4. Внутриклеточные сигнальные пути 18
2.5. Регулируемые нейрональной активностью гены
2.5.1. Ранние гены 27
2.5.2. Гены, экспрессирующиеся преимущественно в глие 31
2.6. Белки S100 35
2.6.1. S100A1 35
2.6.2. S100B
2.7. Вероятные пути регуляции транскрипционного фактора p53 при формировании долговременной потенциации 44
2.8. Проблемы и перспективы развития исследований молекулярно-генетических аспектов долговременной потенциации 50
Глава 3. Объект и методы исследования 53
3.1. Животные 53
3.2. Приготовление срезов гиппокампа 53
3.3. Электрофизиологические эксперименты 54
3.4. Ингибиторы сигнальных путей 58
3.5. Хранение материала 61
3.6. ПЦР в реальном времени 62
3.7. Вестерн блот 67
3.8. Хроматиновая иммунопреципитация 68
3.9. Статистическая обработка 70
Глава 4. Результаты исследования 71
4.1. Оценка эффективности протоколов стимуляции 71
4.2. Динамика уровня мРНК S100B и S100A1 после тетанизации или низкочастотной стимуляции в поле CA1 гиппокампа крыс 74
4.3. Динамика уровня мРНК ранних генов Fos, Jun, JunB и Egr1 после индукции ДВП в поле CA1 гиппокампа крыс 76
4.4. Экспрессия S100B во временном интервале 10-360 мин после тетанизации 80
4.5. Участие p53 в регуляции гена S100B при формировании ДВП 82
4.6. Регуляция экспрессии p53 при формировании ДВП 88
4.7. Вклад глутаматных рецепторов NMDA-типа и протеинкиназ в регуляцию S100B при формировании ДВП 91
4.8. Экспрессия генов-мишеней p53 в ранней фазе долговременной потенциации 99
4.9. Развитие долговременной потенциации в условиях ингибирования p53-зависимой транскрипции 120
Глава 5. Обсуждение результатов 122
5.1. Зависимость экспрессии S100B и S100A1 от нейронной активности в срезах гиппокампа 122
5.2. Экспрессия ранних генов как характеристика экспериментальной модели 125
5.3. Транскрипционный фактор p53 участвует в регуляции генов при формировании долговременной потенциации 127
5.4. Молекулярная сеть, определяющая зависимость p53 и экспрессии S100B от нейронной активности 129
5.5. На пороге расшифровки p53-зависимого компонента транскрипционной программы ДВП 133
Заключение 140
Выводы 145
Список использованных сокращений 147
Список литературы 149
