ВВЕДЕНИЕ ............................................................................................................................. 4
ГЛАВА I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ..................................................................................... 11
1.1 Общая характеристика болезни Паркинсона ............................................................ 11
1.2 Патогенез болезни Паркинсона .................................................................................. 13
1.3 Экспериментальные модели болезни Паркинсона ................................................... 32
1.4 Повреждающее воздействие хронического недостатка сна на головной мозг ...... 40
1.5 Экспериментальные модели хронического ограничения сна.................................. 46
1.6 Шаперон GRP78 ........................................................................................................... 51
1.7 Возможные пути доставки лекарственных препаратов в головной мозг ............... 57
ГЛАВА II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ....................................... 60
2.1 Объект исследования ................................................................................................... 60
2.2 Создание модели доклинической стадии болезни Паркинсона у крыс среднего
возраста с помощью селективного ингибитора протеасом лактацистина ................... 60
2.3 Интраназальное введение рекомбинантного глюкозо-регулируемого белка
теплового шока GRP78 человека ...................................................................................... 63
2.4 Создание модели хронического ограничения сна .................................................... 64
2.5 Схема интраназального введения крысам рекомбинантного белка GRP78 человека
в модели хронического ограничения сна ........................................................................ 65
2.6 Декапитация и взятие материала мозга для иммуногистохимического и
биохимического исследования в моделях доклинической стадии болезни Паркинсона
и хронического ограничения сна ...................................................................................... 66
2.7 Флуоресцентное мечение GRP78 и конфокальная микроскопия ............................ 68
2.8 Иммуногистохимическое исследование .................................................................... 69
2.9 Вестерн-блоттинг ......................................................................................................... 71
2.10 Статистический анализ данных ................................................................................ 73
3
ГЛАВА III РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ............................................................. 74
3.1 Исследование проникновения рекомбинатного белка GRP78 человека в головной мозг при его интраназальном введении в контрольных условиях и в модели болезни Паркинсона у крыс............................................................................................................. 74
3.2 Исследование нейропротективного потенциала рекомбинантного белка GRP78 человека при его интраназальном введении в модели доклинической стадии болезни Паркинсона у крыс............................................................................................................. 79
3.3 Исследование молекулярных механизмов нейропротективного действия рекомбинантного белка GRP78 человека в модели доклинической стадии болезни Паркинсона у крыс............................................................................................................. 81
3.4 Исследование противовоспалительного потенциала рекомбинантного белка GRP78 человека в модели доклинической стадии болезни Паркинсона у крыс ......... 86
3.5 Исследование клеточно-молекулярных изменений в моноаминэргических структурах головного мозга в модели хронического ограничения сна у крыс ........... 92
3.6 Оценка защитного действия рекомбинантного белка GRP78 человека при его интраназальном введении в модели хронического ограничения сна у крыс ............. 104
3.7 Влияние интраназального введения рекомбинантного белка GRP78 человека на функциональное состояние GRP78/eIF2α/CHOP-зависимого апоптотического каскада стресса эндоплазматического ретикулума в модели хронического ограничения сна у крыс ................................................................................................................................... 106
ГЛАВА IV ОБСУЖДЕНИЕ ............................................................................................. 111
ЗАКЛЮЧЕНИЕ .................................................................................................................. 125
ВЫВОДЫ ............................................................................................................................ 128
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ ......................................................... 129
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ ................................................................. 131
