Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы 13
1. Ишемия мозга 13
1.1 Ишемический каскад реакций 15
1.2 Реперфузионный синдром 21
1.3 Модели ишемии мозга 22
2. Современные подходы в терапии ишемического инсульта 24
2.1 Используемая терапия 24
2.1.1 Урокиназа 25
2.1.2 Алтеплаза 25
2.1.3 Стрептокиназа 26
2.1.4 Антикоагулянты 26
2.1.5 Антиагреганты 28
2.1.6 Блокаторы кальциевых каналов 29
2.1.7 Блокаторы глутаматных NMDA рецепторов 30
2.1.8 Блокаторы натриевых каналов 31
2.1.9 Агонисты ГАМК 32
2.1.10 Стабилизаторы мембран 33
2.1.11 Антитела к молекулам адгезии 33
2.2 Антиоксиданты 34
2.2.1 Ловушки свободных радикалов 34
2.2.2 Альфа-липоевая кислота 35
2.2.3 NXY-059 37
2.2.4 Эбселен 38
2.2.5 Мексидол 39
2.2.6 Карнозин 40
2.2.7 Семакс
2.3 Нейротрофические факторы 42
2.4 Стволовые клетки 44
3. Коэнзим Q10 48
3.1 Структура и биосинтез 48
3.2 Функции коэнзима Q10 50
3.3 Применения коэнзима Q10 при заболеваниях центральной нервной системы 59
3.3.1 Коэнзим Q10 при нейродегенеративных заболеваниях з
3.3.2 Коэнзим Q10 при ишемическом повреждении мозга 65
ГЛАВА II. Материалы и методы исследования 71
1. Исследуемые препараты 71
2. In vitro эксперименты
2.1 Получение нейрональной культуры клеток 72
2.2 Моделирование нормобарической гипоксии 72
2.3 Изучение цитотоксичности субстанции коэнзима Q10 и выживаемости нейронов после нормобарической гипоксии 72
2.4 Изучение спонтанной биоэлектрической активности клеток 73
3. In vivo эксперименты 74
3.1 Экспериментальные животные 74
3.2 Наркоз 74
3.3 Внутривенное введение веществ 74
3.4 Расчет смертности животных 75
3.5 Измерение неврологического статуса животных 75
3.6 Моделирование фокальной ишемии головного мозга 77
3.7 Декапитация 79
3.8 Морфологическая оценка очага поражения головного мозга 79
3.9 Планиметрическая обработка фотографий срезов головного мозга крыс, расчет объема очага поражения 80
3.10 Определение тканевого содержания коэнзима Q10 и -токоферола в головном мозге крыс 81
4. Обработка, анализ и представление результатов исследования 83
5. Протоколы экспериментов
5.1 Исследование возможности накопления CoQ10 и -токоферола в интактном головном мозге крыс после однократного внутривенного введения препарата CoQ10 84
5.2 Изучение цитотоксичности субстанции коэнзима Q10 и выживаемости нейронов в условиях нормоксии и гипоксии на модели нейрональной культуры клеток гиппокампа 85
5.3 Изучение нейротропных и нейропротекторных свойств субстанции CoQ10 на модели нормобарической гипоксии нейрональной культуры клеток гиппокампа 86
5.4 Изучение нейропротекторного эффекта однократного внутривенного введения препарата CoQ10 на модели ишемии/реперфузии головного мозга крыс 87
5.5 Изучение нейропротекторного эффекта однократного внутривенного введения препарата CoQ10 на модели необратимой ишемии головного мозга крыс 89
5.6 Сравнение нейропротекторной эффективности однократного внутривенного введения мексидола и препарата коэнзима Q10 на модели ишемии/реперфузии головного мозга крыс 91 5.7 Изучение нейропротекторной эффективности двукратного внутривенного введение препарата CoQ10
на модели ишемии/реперфузии головного мозга крыс 93
ГЛАВА III. Результаты исследования и их обсуждение 95
1. Исследование возможности накопления CoQ10 и -токоферола в интактном головном мозге крыс после однократного внутривенного введения препарата CoQ10 95
2. Изучение цитотоксичности субстанции коэнзима Q10 и выживаемости нейронов после воздействия нормобарической гипоксии 99
3. Изучение нейротропных и нейропротекторных свойств субстанции CoQ10 на модели нормобарической гипоксии на нейрональной культуре клеток гиппокампа 101
4. Изучение нейропротекторного эффекта однократного внутривенного введения препарата CoQ10 на модели ишемии/реперфузии головного мозга крыс 106
5. Изучение нейропротекторного эффекта однократного внутривенного введения препарата CoQ10 на модели необратимой ишемии головного мозга крыс 114
6. Сравнение нейропротекторной эффективности однократного внутривенного введения мексидола и препарата коэнзима Q10 на модели ишемии/реперфузии головного мозга крыс 121
7. Изучение нейропротекторной эффективности двукратного внутривенного введения препарата CoQ10 на
модели ишемии/реперфузии головного мозга крыс 129
ГЛАВА IV. Заключение 137
Итоги 137
Выводы 139
Практические рекомендации 140
Список сокращений и терминов 141
Приложения 142
Список литературы 146
