Введение
1. Литературный обзор 10
1.1. Цепные процессы в органической химии и биологии 10
1.1.1. Общие теоретические представления о цепных процессах и основные типы их механизмов 10
1.1.2. Некоторые аспекты теории цепных процессов в применении к биологическим системам 20
1.2. Активные форм кислорода и их роль в процессах жизнедеятельности 29
1.2.1. Генерация и реакционная способность активных форм кислорода. 29
1.2.2. Важнейшие реакции активных формгк#слорода с биообъектами V. 38
1.2.3. Белки как объекты пероксидации 46
1.2.4. Судьба активных форм кислорода в тканях 69
1.3. Пероксидные процессы при различных патологических состояниях 80
1.4. Краткая характеристика объектов исследования 85
1.4.1. Ацетилхолинэстераза 85
1.4.2. Гемоглобин 89
1.4.3. Альбумин 94
2. Обсуждение результатов 98
2.1. Исследование повреждения полипептидной цепи под действием активных форм кислорода 98
2.1.1. Пероксидное повреждение альбумина 98
2.1.1.1. Исследование пероксидного повреждения альбумина, инициированного реактивом Фентона 98
2.1.1.2. Исследование пероксидного повреждения альбумина под действием отдельных компонентов реактива Фентона 114
2.1.1.3. Исследование аутоокисления альбумина 126
2.1.1.4. Исследование пероксидного повреждения альбумина, инициированного системой нитрит-ион - пероксид водорода 129
2.1.1.5. Исследование пероксидного повреждения альбумина в присутствии нитрит-иона 137
2.1.2. Исследование пероксидного повреждения гемоглобина 139
2.1.2.1. Исследование аутоокисления гемоглобина 139
2.1.2.2. Исследование окисления гемоглобина, инициированного реактивом Фентона 145
2.1.2.3. Исследование пероксидного повреждения гемоглобина под действием отдельных компонентов реактива Фентона 150
2.1.2.4. Исследование пероксидного повреждения гемоглобина, инициированного системой
пероксид водорода - нитрит-ион 158
2.1.2.5. Исследование пероксидного повреждения гемоглобина под действием нитрит-иона 163
2.2. Инактивации ацетилхолинэстеразы под действием активных форм кислорода 167
2.2.1. Инактивации ацетилхолинэстеразы реактивом Фентона 167
2.2.2. Инактивация ацетилхолинэстеразы системой нитрит-ион - пероксид водорода 172
2.2.3. Инактивации ацетилхолинэстеразы системой оксигемоглобин - нитрит-ион 176
2.3. Влияние ловушек свободных радикалов на скорость процесса пероксидного повреждения полипептидной цепи 181
2.3.1. Ингибирование процесса пероксидного окисления белков классическими ловушками АФК 181
2.3.2. Ингибирование процесса пероксидного окисления ацетилхолинэстеразы нитроксильным радикалом 187
2.3.3. Изучение процесса пероксидного окисления ацетилхолинэстеразы в опытах in vivo 189
2.3.3.1. Изменение активности ацетилхолинэстеразы эритроцитов под действием системы оксигемоглобин - нитрит-ион в опытах in vivo 189
2.3.3.2. Ингибирование нитроксильным радикалом процесса пероксидного окисления ацетилхолинэстеразы в опытах in vivo 191
2.4. Определение уровня пероксидного окисления белков и липидов в некоторых биологических объектах 193
2.4.1. Определение уровня пероксидного окисления белков и липидов в крови больных с различными патологиями 193
2.4.2. Определение уровня пероксидного окисления белков и липидов в детских молочных продуктах 203
3. Экспериментальная часть 208
3.1. Приборы 208
3.2. Материалы 209
3.3. Методы 210
3.3.1. Изучение пероксидного повреждения белков спектрофотометрическим методом 210
3.3.2. Изучение пероксидного повреждения белков методом хемилюминесценции 212
3.3.3. Измерение степени инактивации ацетилхолинэстеразы 213
3.3.4. Обработка образцов крови 215
3.3.5. Определение содержания диеновых коньюгатов в сыворотке крови 216
3.3.6. Определение содержания малонового диальдегида в сыворотке крови 217
3.3.7. Измерение индуцируемого пероксидного гемолиза эритроцитов 218
3.3.8. Измерения степени инактивации ацетилхолинэстеразы в гемолизате в опытах in vivo 218
3.3.9. Определение концентрации общего гемоглобина 220
3.3.10. Определение форм гемоглобина 220
3.4. Математическая обработка результатов исследований 223
3.4.1. Построение графиков по результатам исследований 223
3.4.2. Оценка экспериментальных данных 224
Выводы 226
Библиографический список использованной литературы 228
Приложения 256
