Введение
I. Обзор литературы 13
1.1. Биотехнологические методы защиты растений от болезней и повыше ния урожайности сельскохозяйственных культур. 13
1.1.1. Бактерии родов Pseudomonas и Azotobacter — антагонисты фитопатогенных грибов и бактерий. 14
1.1.2. Бактерии родов Pseudomonas и Azotobacter как представители группы PGPR. 18
1.1.3. Колонизация ризосферы растений бактериями-антагонистами родов Pseudomonas и Azotobacter. 30
1.1.4. Применение биопрепаратов на основе псевдомонад и азотобак тера для защиты растений от болезней. 39
1.2. Биотехнологические методы очистки окружающей среды от нефтяного загрязнения . 45
1.2.1. Влияние нефтяного загрязнения на микробиологические процесссы в почве. 46
1.2.2. Микроорганизмы - деструкторы нефти и нефтепродуктов. 50
1.2.3. Бактериальные препараты для интродукции микроорганизмов при ликвидации нефтяных загрязнений. 57
И. Объекты и методы исследований 65
2.1. Объекты исследований. 65
2.2. Скрининг штаммов-антагонистов фитопатогенных грибов среди бактерий родов Pseudomonas и Azotobacter. 67
2.3. Скрининг микроорганизмов-нефтедеструкторов. 69
2.4. Изучение фенотипических характеристик выделенных культур. 70
2.5. Определение у штаммов псевдомонад и азотобактера способности к синтезу фитогормональных веществ. 71
2.6. Определение нитрогеназной активности штаммов псевдомонад и азотобактера. 71
2.7. Определение у штаммов псевдомонад и азотобактера способности к разложению соединений фосфора . 72
2.8. Изучение влияния железа на антифунгальную активность штаммов пседомонад и азотобактера. 72
2.9. Исследование хитинолитической активности штаммов псевдомонад и азотобактера. 73
2.10. Изучение антагонистического воздействия штаммов псевдомонад и азотобактера на развитие грибных фитопатогенов. 73
2.11. Изучение условий культивирования, влияющих на биосинтез метаболитов Pseudomonas, обладающих фунгицидной активностью. 74
2.12. Выделение метаболитов Pseudomonas, обладающих фунгицидной активностью. 74
2.13. Методы изучения состава и структуры метаболитов Pseudomonas, обладающих фунгицидной активностью. 75
2.14. Комплексообразование метаболитов Pseudomonas с углеводами, определение стехиометрии комплексов. 76
2.15. Изучение ростстимулирующей активности штаммов псевдомонад и азотобактера. 77
2.16. Изучение оптимальных способов хранения в лабораторных условиях штаммов-антагонистов pp. Pseudomonas и Azotobacter и консорциума микроорганизмов-нефтедеструкторов. 78
2.17. Исследование эффективности применения штаммов бактерий родов Pseudomonas и Azotobacter против корневых гнилей пшеницы в лабораторных экспериментах. 80
2.18. Оценка эффективности применения штаммов бактерий родов Pseudomonas и Azotobacter против возбудителей корневых гнилей пшеницы в условиях полевого эксперимента. 81
2.19. Оценка эффективности применения штаммов бактерий рода Pseudo-monas против твердой головни пшеницы в условиях закрытого и открытого грунтов. 82
2.20. Оценка эффективности применения штаммов бактерий родов Pseudo-monas и Azotobacter в качестве агентов биологического контроля заболеваний овощных культур в лабораторно-вегетационных опытах. 84
2.21. Характеристика агроклиматических условий вегетационных сезонов. 87
2.22. Получение антибиотикрезистентных модификаций штаммов Pseudo-monas aureofaciens ИБ 51 и Azotobacter vinelandii ИБ 4. 88
2.23. Изучение способности к колонизации корней растений у антибиотик-резистентных штаммов Ps. aureofaciens ИБ 51str и Az. vinelandii ИБ 4amp. 90
2.24. Исследование окислительной активности микроорганизмов — деструкторов нефти и нефтепродуктов. 93
2.25. Изучение эффективности процесса биодеструкции нефти в лабораторных и полевых экспериментах. 94
2.26. Исследование процесса концентрирования биомассы микроорганизмов в лабораторных условиях. 95
2.27. Математическая и статистическая обработка результатов. 96
III. Скрининг природных бактерий родов pseudomonas и azotobacter - антагонистов фитопатогенов и их характеристика в аспекте основы биопрепаратов сельскохо зяйственного назначения . 97
3.1. Выделение и фенотипическая характеристика новых штаммов бактерий родов Pseudomonas и Azotobacter - антагонистов фитопатогенных грибов. 97
3.2. Характеристика выделенных культур по наличию свойств, положительно влияющих на растение. 114
3.2.1. Фитогормоны, синтезируемые штамхмами псевдомонад и азотобактера. 114
3.2.2. Нитрогеназная активность штаммов псевдомонад и азотобактера. 115
3.2.3. Исследование у штаммов псевдомонад и азотобактера способности к разложению фосфатов. 121
3.3. Особенности антагонистического действия штаммов псевдомонад и азотобактера на фитопатогенные грибы. 123
3.4. Изучение ростстимулирующей активности штаммов псевдомонад и азотобактера. 134
3.5. Выделение, очистка и характеристика метаболитов, обладающих фунгицидной активностью, продуцируемых бактериями pp. Pseudomo-nas и Azotobacter. 141
IV. Оценка эффективности применения новых штаммов бактерий родов pseudomonas и azotobacter для защиты растений от болезней и повышения урожайности сельскохозяйственных культур. 160
4.1. Изучение влияния интродукции штаммов-антагонистов родов Pse-udomonas и Azotobacter на аборигенную почвенную микробиоту и колонизирующей способности интродуцированных штаммов. 160
4.1.1. Изучение влияния интродукции штаммов-антагонистов родов Pseudomonas и Azotobacter на микробиоту ризосферы пшеницы. 160
4.1.2. Изучение колонизирующей способности штаммов Pseudomonas aureofaciens ИБ 51str и Azotobacter vinelandii ИБ 4amp. 164
4.2. Изучение эффективности применения штаммов псевдомонад и азотобактера для защиты пшеницы от корневых гнилей, альтернариоза, твердой головни в условиях вегетационных, полевых и производственных испытаний. 171
4.3. Изучение эффективности применения штаммов псевдомонад и азотобактера в качестве агентов биологического контроля заболеваний овощных культур. 193
V. Разработка и испытания нового биопрепарата-нефтедеструктора «ленойл» . 201
5.1. Характеристика нового консорциума микроорганизмов-нефтедеструк-торов. 201
5.2. Исследование окислительной активности консорциума микроорганиз
мов. 204
5.3. Испытания биопрепарата «Ленойл» для биологической рекультивации нефтезагрязненных объектов. 208
5.4. Разработка способов ремедиации природных объектов с использованием биопрепарата «Ленойл». 217
5.5. Разработка нормативно-технической документации на биопрепарат «Ленойл». 232 CLASS VI. Разработка технологии опытно-промышленного производства биопрепаратов на основе бактерий-антагонистов и микроорганизмов-нефтедеструкторов . 235 CLASS
6.1. Исследование процесса выделения биомассы микроорганизмов из куль-туральной жидкости. 235
6.2. Разработка твердых препаративных форм биопрепаратов. 240
6.3. Технологическая схема опытно-промышленного производства биопрепаратов. 248 Заключение 252
Выводы 257
Практические предложения и рекомендации 259
Список литературы 261
Пложения
