Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
1.1. Общая характеристика и структурно-функциональная организация хроматина дрожжей Saccharomyces cerevisiae 8
1.2. Регуляция активности хроматина Saccharomyces cerevisiae 23
1.3. Биологическая активность ядерных белков-регуляторов 32
1.4. Получение ядерных негистоновых белков дрожжей 35
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 38
2.1. Материалы исследования 38
2.2. Методы исследования 43
2.2.1. Метод получения НПК 43
2.2.2. Метод фракционирования НПК при микрофильтрации 43
2.2.3. Вискозиметрия 47
2.2.4. Метод определения белка по Лоури . 48
2.2.5. Орциновый метод определения РНК 48
2.2.6. Гель-хроматография 51
2.2.7. Ферментативный гидролиз 53
2.2.8. Бумажная хроматография 53
2.2.9. Метод гель-электрофореза 54
2.2.10. Ионообменная хроматография 55
2.2.11. Приготовление буферных растворов 56
2.2.12. Комплексообразование 56
2.2.13. Реакция торможения миграции лейкоцитов 56
2.2.14. Определение антистрессорной активности НПК 58
3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Разработка метода выделения НПК из дрожжей Saccharomyces cerevisiae 61
3.3.1. Выбор экстрагента и термодинамических условий экстракции...61
3.3.2. Фракционирование экстракта мембранной микрофильтрацией...71
3.3.3. Осаждение НПК 78
3.2. Исследование компонентного состава НПК дрожжей 80
3.2.1. Изучение углеводного состава НПК 80
3.2.2. Исследование белковых компонентов НПК 82
3.2.3. Гель-хроматография НПК 85
3.3. Изучение особенностей организации НПК дрожжей 93
3.3.1. Фракционирование НПК на ионитах 93
3.3.2. Исследование взаимодействия нуклеиновых кислот с
белками по спектральным характеристикам 99
3.4. Исследование биологической активности НПК дрожжей 101
3.4.1. Исследование антистрессорного действия НПК 101
3.4.2. Изучение митогенной ативности НПК 106
ВЫВОДЫ 109
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
