Введение
ГЛАВА 1. Особенности рассеянного склероза как аутоиммунного заболевания и возможная роль семафорина sema4d/cd100 в его патогенезе (обзор литературы) 16
1. Рассеянный склероз: современный взгляд на аутоиммунное заболевание нервной системы, актуальность изучения проблемы 16
1.1. Ключевые аспекты патогенеза рассеянного склероза 17
1.1.1. Взаимодействие нервной и иммунной системы при рассеянном склерозе 17
1.1.2. Роль Т- и В-клеток в патогенезе рассеянного склероза 18
1.1.3. Роль цитокинов при рассеянном склерозе 21
1.1.4. Представление о демиелинизации при рассеянном склерозе 22
1.1.5. Основополагающие механизмы ремиелинизации при рассеянном склерозе 23
1.2. Клинические аспекты ремиттирующего рассеянного склероза как основного типа течения заболевания 24
1.3. Диагностические критерии рассеянного склероза. Значение иммунологических исследований при рассеянном склерозе 25
2. Семафорины - ключ к пониманию иммунных ответов в нервной системе 28
2.1. Общая характеристика семейства семафоринов, их роль при патологических процессах 28
2.2. Участие семафоринов в функционировании нервной системы 29
2.3. Представление об иммунных семафоринах 30
2.4. Возможное участие семафоринов в патогенезе рассеянного склероза .. 31
2.5. Представитель семафоринов - Sema4D/ CD100 з
2.6. Рецепторы Sema4D/CD100: plexin-Bl, plexin-B2 и CD72 34
2.7. Роль Sema4D/CD100 в В-клеточных ответах 37
2.8. Роль Sema4D/CD100 в Т-клеточных ответах 37
2.9. Растворимая форма Sema4D/CD100 (sSema4D), ее биологические функции 38
2.10. Данные, полученные на животной модели рассеянного склероза (в
условиях экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита), при
изучении Sema4D/CD 100 39
3. Актуальность проблемы поиска терапевтических стратегий при рассеянном склерозе и перспектива использования семафоринов в данном процессе 40
ГЛАВА 2. Общая характеристика наблюдений, материалы и методы 43
2.1. Дизайн исследования, объем наблюдений 43
2.2. Клиническая характеристика, субпопуляционный состав мононуклеарных клеток периферической крови пациентов с рассеянным склерозом 45
2.3. Основные методы исследования 49
2.3.1. Психометрическое тестирование 49
2.3.2. Тестирование когнитивных функций 49
2.3.3. Интерпретация данных магнитно-резонансной томографии головного мозга 50
2.3.4. Лабораторные методы исследования
2.3.4.1. Показатели, оцененные ex vivo 53
2.3.4.2. Показатели, оцененные после культивирования клеток 53
2.3.4.3. Подготовка проб для цитометрического исследования 54
2.3.4.4. Алгоритм цитометрического исследования экспрессии Sema4D/CD100 субпопуляциями CD3+CD4+и CD3+CD8+ Т-лимфоцитов 55 2.3.4.5. Алгоритм цитометрического анализа экспрессии Sema4D/CD100 Т-лимфоцитами (CD3+ клетками) и экспрессии CD72 В-лимфоцитами (CD19+ клетками) 59
2.3.4.6. Алгоритм цитометрического исследования экспрессии внутриклеточных цитокинов В-лимфоцитами (CD19+ клетками) 63
2.3.4.7. Оценка уровня растворимого семафорина 65
2.3.5. Статистические методы, применяемые в исследовании 66
ГЛАВА 3. Характеристика пациентов с ремиттирующим типом течения рассеянного склероза, не получавших терапию препаратами, изменяющими течение рассеянного склероза 68
3.1. Характеристика группы пациентов с рассеянным склерозом по клиническим показателям 68
3.2. Особенности нейровизуализационных данных в обследованной группе 80
3.3. Показатели когнитивного тестирования и психометрических шкал у пациентов с рассеянным склерозом 82
3.4. Применение гормональной терапии при лечении пациентов с рассеянным склерозом 94
ГЛАВА 4. Оценка роли семафорина sema4d/cd100 в контроле функции иммунокомпетентных клеток при рассеянном склерозе 95
4.1. Экспрессия семафорина Sema4D/CD100 Т-лимфоцитами ex vivo у пациентов с рассеянным склерозом и здоровых доноров 95
4.2. Экспрессия семафорина Sema4D/CD100 интактными и активированными Т-лимфоцитами (CD3+ клетками) у пациентов в стадии ремиссии рассеянного склероза и здоровых доноров in vitro (в культуре) 99
4.3. Уровень растворимого семафорина (sSema4D) в плазме крови и культуре Т-лимфоцитов (CD3+ клеток) у пациентов с рассеянным склерозом и здоровых доноров 109
4.4. Экспрессия рецептора для Sema4D/CD100 - CD72 - В-лимфоцитами (CD19+ клетками) у пациентов в стадии ремиссии рассеянного склероза в сравнении с контрольной группой 118
4.5. Синтез ключевых про- и противовоспалительных цитокинов В лимфоцитами у пациентов в стадии ремиссии рассеянного склероза в сравнении с контрольной группой 122
4.6. Клинические примеры 129
Обсуждение результатов исследования (заключение)... 141
Выводы 150
Практические рекомендации 152
Список литературы
