Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1.1. Иммобилизация наночастиц на поверхность живых клеток 12
1.1.1. Непосредственная иммобилизация наночастиц 12
1.1.2. Взаимодействие живых клеток с многослойными полимерными пленками 17
1.1.3. Полимер-опосредованная иммобилизация наноматериалов на поверхность клеток 1.2. Взаимодействие Caenorhabditis elegans с наноматериалами 26
1.3. Токсическое влияние серебряных наночастиц на организм Caenorhabditis elegans 29
1.4. Взаимодействие нематод с бактериями 33
1.5. Антибактериальное действие серебряных наночастиц 35
1.6. Взаимодействие бактерий с магнитными наночастицами 38
1.7. Общая характеристика нанотрубок галлуазита и их использование в биотехнологии 39
ГЛАВА 2. Экспериментальная часть 45
2.1. Реактивы 45
2.2. Расходные материалы 45
2.3. Оборудование 46
2.4. Объекты исследования и их подготовка 47
2.5. Методы исследования
2.5.1. Синтез полиаллиламин гидрохлорид-стабилизированных магнитных наночастиц оксида железа 47
2.5.2. Определение концентрации магнитных наночастиц спектрофотометрическим методом 49
2.5.3. Синтез цитрат-стабилизированных серебряных наночастиц 50
2.5.4. Характеристика наноматериалов 51
2.5.5. Культивирование микроорганизмов 54
2.5.6. Модификация клеточной стенки микроорганизмов наночастицами и полимерными пленками з
2.5.7. Оптическая микроскопия в режиме светлого поля и флуоресценции 59
2.5.8. Темнопольная микроскопия 59
2.5.9. Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ)
2.5.10. Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ) 61
2.5.11. Оценка жизнеспособности наномодифицированных клеток 62
2.5.12. Культивирование нематоды С. elegans 64
2.5.13. Подготовка пищевого субстрата для нематод 65
2.5.14. Получение синхронной культуры нематод 66
2.5.15. Растворы для поддержания культуры C.elegans 67
2.5.16. Оценка влияния наномодифицированных бактерий и наночастиц на рост нематод 68
2.5.17. Оценка влияния наномодифицированных бактерий на размножение нематод 69
2.5.18. Статистическая обработка данных 69
2.5.19. Процедура загрузки бриллиантового зеленого 71
2.5.20. Формирование нанопокрытия из комплекса бензотриазол-медь на поверхности галлуазита 72
2.5.21. Динамика высвобождения бриллиантового зеленого из нанотрубок галлуазита 74
2.5.22. Термогравиметрический анализ 75
2.5.23. Оценка жизнеспособности Staphilococcus aureus 76
ГЛАВА 3. Результаты исследований и их обсуждение 77
3.1. Характеристика магнитных и серебряных наночастиц 77
3.2. Модификация клеточной поверхности микроорганизмов магнитными и серебряными наночастицами 80
3.3. Характеристика распределения наноматериалов на поверхности клеточных стенок микроорганизмов 82
3.4. Характеристика жизнеспособности наномодифицированных клеток 89
3.5. Характеристика нанотрубок галлузита 94
3.6. Изучение кинетики высвобождения бриллиантового зеленого из просвета нанотрубок галлуазита 95
3.7. Оценка цитотоксического эффекта нанотрубок галлуазита 104
3.8. Токсическое влияние наномодифицированных клеток микроорганизмов на нематоду С. elegans 108
Выводы 119
Список сокращений и условных обозначений 120
Список литературы
