Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Особенности протекания биохимических процессов при экспериментальном диабете 13
1.1.1. Сахарный диабет - болезнь обмена углеводов 13
1.1.2. Биохимические аспекты патогенеза сахарного диабета 13
1.1.3. Биохимические аспекты аллоксанового диабета 14
1.2. Трансформация основных запасающих веществ в животном организме 15
1.2.1. Катаболизм белков в тканях животных 15
1.2.2. Синтез и расщепление жирных кислот 16
1.2.3. Метаболизм углеводов 17
1.2.4. Трансформация липидов в гликоген в клетках высших животных и человека 19
1.3. Особенности глюконеогенетических процессов у животных... 25
1.3.1. Ультраструктурные изменения клеток животных при диабете и голодании 25
1.3.1.1. Взаимосвязь липидных включений с микротельцами, лизосомами и гликогеновыми отложениями 25
1.3.1.2. Роль аминотрансфераз в глюконеогенезе 27
1.3.2. Трансформация липидов в гликоген в клетках высших животных и человека 30
1.4. Глиоксилатный цикл как промежуточный этап глюконеогенеза 34
1.4.1. Распространение и локализация глиоксилатного цикла 35
1.4.2. Распространение глиоксилатного цикла у высших растений... 40
1.4.3. Глиоксилатный цикл в тканях животных 42
1.4.4. Микротельца и их метаболическая функция 44
1.4.5. Роль микротелец в трансформации липидов в гликоген 49
1.4.6. Экспрессия и регуляция работы глиоксилатного цикла 55
Глава 2. Экспериментальная часть 60
2.1. Цель и задачи 60
2.2. Объекты и методы исследования 60
2.2.1. Объекты исследования 60
2.2.2. Методы исследования 61
2.2.2.1. Создание условий пищевой депривации и экспериментального диабета 61
2.2.2.2. Получение материалов различных тканей 61
2.2.2.3. Дифференциальное центрифугирование 61
2.2.2.4. Определение активности ферментов 61
2.2.2.5. Выделение и очистка ферментов 64
2.2.2.6. Экстракция 65
2.2.2.7. Фракционирование белков с помощью сульфата аммония 65
2.2.2.8. Гель-фильтрация 65
2.2.2.9. Ионообменная хроматография 66
2.2.2.10. Исследование кинетических характеристик и регуляции активности ферментов 67
2.2.2.11. Аналитический электрофорез 67
2.2.2.12. Выделение РНК и проведение ПЦР 68
2.2.2.13. Контроль за индукцией диабета 69
2.2.2.14. Определение количества белка 70
2.2.2.15. Статистическая обработка данных 70
2.3. Полученные результаты и их обсуждение 71
2.3.1. Влияние индуцированного диабета на глюконеогенетические процессы 71
2.3.2. Динамика активности ферментов углеводного метаболизма... 73
2.3.3. Изменение активности Ал AT и Ac AT у крыс с диабетом 75
2.3.4. Активность ферментов катаболизма 76
2.3.5. Очистка изоцитратлиазы из печени крыс и изучение ее свойств 80
2.3.6. Физико-химические и регуляторные характеристики 86
2.3.7. Очистка и регуляторные свойства малатсинтазы 92
2.3.8. Регуляторные свойства малатсинтазы 101
2.3.9. Влияние метаболитов на активность малатсинтазы 108
2.4. Разработка праймеров и проведение ПЦР для идентификации гена изоцитратлиазы в геноме животных 111
Заключение 118
Выводы 121
Список использованной литературы 123
