Введение
1 Обзор литературы 13
1.1 Эпилепсия (определение, эпидемиология, классификация, основные проблемы при лечении) 13
1.1.1 Определение и эпидемиология эпилепсии .13
1.1.2 Классификация, клиника и осложнения при эпилепсии 15
1.1.3 Патофизиологические механизмы эпилепсии .19
1.1.4 Нейрохимические механизмы эпилепсии 20
1.2 Основные противоэпилептические препараты 24
1.2.1 Фармакологические свойства, клиническое применение и механизмы действия противоэпилептических препаратов первой линии 24
1.3 Препараты рацетамового ряда 27
1.3.1 Клиническое применение препаратов рацетамового ряда .29
1.3.2 Нейрохимические механизмы действия препаратов рацетамового ряда 38
1.4 Фармакология кумаринов .44
2 Материалы и методы 50
2.1 Животные 50
2.2 Используемые вещества. Установки и приборы 50
2.3 Дизайн исследования 52
2.4 Методики оценки противосудорожного действия 54
2.4.1 Методика максимального электрошока 54
2.4.2 Методика антагонизма с коразолом 55
2.4.3 Метод антагонизма с пилокарпином 56
2.4.4 Метод антагонизма с пилокарпином с предварительным введением раствора хлорида лития .57
2.4.5 Метод антагонизма с тиосемикарбазидом 58
2.5 Методы оценки неврологического дефицита и острой токсичности 59
2.5.1 Метод вращающегося стержня – тест Rotarod 59
2.5.2 Метод – подтягивание на перекладине 59
2.5.3 Метод оценки острой токсичности 59
2.6 Электрофизиологические методики 59
2.6.1 ЭЭГ-исследование первично-генерализованной эпилептической активности, вызванной бемегридом 59
2.6.2 Тест создания хронического эпилептогенного очага, вызванного аппликацией кобальта 61
2.7 Методики изучения нейропсихотропныхэффектов .62
2.7.1 Тест водного лабиринта Морриса 62
2.7.2 Тест закрытого крестообразного лабиринта .64
2.7.3 Метод нормобарической гипоксии .65
2.8 Нейрохимические методы .66
2.8.1 Метод радиорецепторного связывания 66
2.8.1.1 Выделение плазматических мембран структур головного мозга с ГАМКA-, ГАМКB-, NMDA- и mGluII-рецепторами мозга 66
2.8.1.2 Радиолигандный анализ связывания с ГАМКA-, ГАМКB-, NMDA- и mGluII-рецепторами мозга крыс 68
2.8.2 Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуоресцентной детекцией .70
2.9 Статистическая обработка результатов .71
3 Результаты исследования .72
3.1 Изучение противосудорожных свойств в базисных тестах скрининга .72
3.1.1 Изучение противосудорожных свойств производных 4-фенилпирролидона и кумарина в тесте максимального электрошока .72
3.1.2 Изучение противосудорожных свойств производных 4-фенилпирролидона и кумарина в тесте антагонизма с коразолом .78
3.1.3 Анализ зависимости «структура-активность» .83
3.2 Расширенное изучение противосудорожных свойств производных 4-фенилпирролидона и кумарина .87
3.2.1 Исследование соединений в тесте антагонизма с пилокарпином .88
3.2.2 Исследование соединений в тесте антагонизма с пилокарпином с предварительным введением раствора хлорида лития .88
3.2.3 Исследование соединений в тесте антагонизма с тиосемикарбазидом 90
3.3 Изучение острой токсичности и способности вызывать неврологический дефицит 92
3.4 Изучение противосудорожного действия соединения ГИЖ-290 и леветирацетама на электрофизиологических моделях судорожных состояний 93
3.4.1 Исследование влияния веществ на ЭЭГ модели первично-генерализованной эпилептической активности, вызванной бемегридом .93
3.4.2 Исследованиевлияния веществ на первично- и вторично-генерализованные судороги в различных структурах мозга в условиях хронической модели очаговой (фокальной) эпилепсии, индуцированной кобальтом .98
3.5 Изучение нейропсихотропных свойств соединения ГИЖ-290 и леветирацетама 101
3.5.1 Влияние веществ на выработку и воспроизведение пространственного навыка в тесте водного лабиринта Морриса 101
3.5.2 Влияние веществ на поведение мышей линий BALB/c и С57ВL/6 в тесте закрытого крестообразного лабиринта .104
3.5.3 Противогипоксическое действие веществ в тесте нормобарической гипоксии .106
3.6 Изучение нейрохимических механизмов действия соединения ГИЖ-290 и леветирацетама 106
3.6.1 Изучение влияния ГИЖ-290 на содержание возбуждающих и тормозных аминокислот в гиппокампе и коре мозга крыс 107
3.6.2 Влияние ГИЖ-290 на рецепторы ГАМК и глутамата .110
3.6.2.1 Связывание с ГАМКA-, ГАМКB-, NMDA- и mGluII-рецепторами ex vivo .110
3.6.2.2 Связывание с ГАМКA-, ГАМКB-, NMDA- и mGluII-рецепторами in vitro .115
4 Обсуждение результатов 117
Выводы 126
Практические рекомендации 127
Список литературы 128
