Введение
ГЛАВА 1. Участие активных форм кислорода и азота в развитии ожоговой болезни (обзор литературы) 14
1.1. Краткая характеристика патогенеза ожоговой травмы 14
1.2. Образование и роль активных форм кислорода и азота в организме 17
1.2.1. Строение и химия активных форм кислорода и азота 17
1.2.2. Основные пути образования активных форм кислорода и азота в организме.. 19
1.2.3. Токсичность активных форм кислорода и азота 20
1.2.4. Система антиоксидантной защиты 22
1.3. Образование активных форм кислорода при ожоговой травме 29
1.3.1. Влияние ожоговой травмы на микроциркуляцию в зоне повреждения и инициация роста продукции активных форм кислорода 29
1.3.2. Активация радикал-продуцирующей активности нейтрофилов при ожоговой травме 33
1.3.3. Продукты распада и термической модификации обожженной ткани как стимуляторы активности нейтрофилов 39
1.3.4. Регуляторная роль цитокинов при ожоговой травме 41
1.3.5. Роль циклооксигеназы и метаболизма арахидоновой кислоты в образовании активных форм кислорода при ожогах 43
1.3.6. Влияние эндотоксемии на образование активных форм кислорода и азота при ожогах 44
1.3.7. Провоспалителыюе действие активных форм кислорода и азота 48
1.3.8. Связь между активными формами кислорода и протеазной активностью в крови и тканях при ожогах 51
1.4. Участие активных форм кислорода и азота в процессах ранозаживления...52
1.5. Значение активных форм кислорода и азота в развитии полиорганной недостаточности при ожоговой болезни 62
1.5.1 Активация перекисного окисления липидов и состояние системы антиоксидантной защиты при тяжелых ожогах 62
1.5.2 Синдром полиоргашюй недостаточности при ожогах 64
1.5.3 Ожоги и повреждение легких 65
1.5.4 Ожоги и болезни желудочно-кишечного тракта 66
1.6. Влияние хирургии и терапии на продукцию активных форм кислорода и азота 68
1.6.1. Влияние хирургического лечения на продукцию активных форм кислорода и азота нейтрофилами 68
1.6.2. Влияние плазмофереза на продукцию активных форм кислорода нейтрофилами 72
1.6.3. Эффекты антиоксидантной терапии при ожогах 73
1.6.4. Влияние антиоксидантов на процессы ранозаживления 80
1.7. Резюме 82
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 84
2.1. Реактивы 84
2.2. Клинические методы исследования 84
2.2.1. Характеристика групп больных 84
2.2.2. Характеристика групп пациентов, перенесших пластические операции 85
2.2.3. Схемы забора материала для биохимических исследований 85
2.3. Экспериментальные методы исследования 86
2.31. Моделирование ожоговой травмы у крыс 86
2.3.2. Моделирование ожоговой травмы, осложненной эндотоксемией, у крыс 87
2.3.3. Моделирование эндотоксемии у крыс 87
2.3.4. Забор экспериментального материала у животных в модели ожоговой травмы 87
2.3.5. Моделирование полнослойной эксцизионной раны у крыс 87
2.3.6. Изучение местного ранозаживляющего действия фитопрепарата на основе ферментированной папайи 88
2.3.7. Изучение эффектов комплекса витамипов-антиоксидантов и аминокислот при ожоговой травме у крыс 88
2.3.8. Изучение эффектов комплекса витаминов-антиоксидантов и аминокислот при эндотоксемии у крыс 88
2.3.9. Изучение эффектов комплекса витаминов-антиоксидантов и аминокислот при экспериментальных ожогах, осложненных эндотоксемией, у крыс 89
2.4. Лабораторные методы исследования 89
2.4.1 Забор образцов крови у пациентов и доноров 89
2.4.2. Забор образцов крови у экспериментальных животных 89
2.4.3. Выделение и подготовка к анализам исследуемых компонентов крови 89
2.4.4. Забор и подготовка к анализам образцов кожи, струпов, ткани раны и легких экспериментальных животных 91
2.5. Методы оценки продукции активных форм кислорода клетками крови 91
2.6. Биохимические методы анализа 92
2.6.1. Методы определения активности антиоксидантних ферментов 92
2.6.1.1.Оценка активности каталазы 92
2.6.1.2.Оценка активности супероксиддисмутазы 92
2.6.1.3. Оценка активности глутатионпероксидазы 93
2.6.1.4. Оценка активности глутатион-8-трансферазы 95
2.6.2. Оценка активности миелопероксидазы 95
2.6.3. Определение общей антиокислительной активности плазмы 96
2.6.4. Оценка содержания ТБК-активных продуктов в плазме и гомогенатах тканей.. 97
2.6.5. Определение общего содержания белка 97
2.6.6. Оценка содержания гемоглобина 97
2.6.7. Оценка железо-связывающей способности плазмы 98
2.6.8. Оценка количества восстановленного глутатиона 98
2.7. Модельные системы для изучения антиоксидантних свойств препаратов in vitro 98
2.7.1. Система генерации супероксидного радикала (ксантин-ксантин оксидаза) 98
2.7.2. Оценка влияния исследуемых препаратов на активность ксантин оксидазы 98
2.7.3. Система генерации гидроксильного радикала (FeS04-H202) 99
2.7.4. Оценка эффектов препаратов в модельной системе липидной пероксидации...99
2.7.5. Система оценки эффектов препаратов на хемилюминесценцию клеток крови 99
2.8. Статистическая обработка результатов 100
ГЛАВА 3. Результаты исследования 101
3.1. Клинико-лабораторное исследование хемилюминеснентной и антиоксидантной активности крови пациентов с ожогами 101
3.1.1. Результаты измерения хемилюминесценции изолированных нейтрофилов периферической крови пациентов с ожогами 102
3.1.2. Сравнительная оценка хемилюминесценции цельной крови и изолированных нейтрофилов здоровых доноров 104
3.1.3. Результаты анализа хемилюминесценции цельной крови пациентов с ожогами 108
3.1.4. Результаты оценки активности антиоксидантных ферментов эритроцитов у пациентов с ожогами 115
3.1.5. Анализ изменения антиокислителыюй и железосвязывающей активности плазмы у пациентов с ожогами 117
3.1.6. Исследование влияния хирургической некрэктомии на хемилюминесценцию нейтрофилов 119
3.1.7. Исследование эффектов хирургической травмы кожи и мягких тканей лица на хемилюминесценцию лейкоцитов 121
3.2. Экспериментально-лабораторное исследование влияния ожоговой травмы нахемилюминесцентную и антиоксидантную активность крови крыс и показатели тканевого воспаления 123
3.2.1. Оценка хемилюминесценции цельной крови в модели термической травмы у крыс 124
3.2.2. Оценка показателей антиоксидантной активности крови экспериментальных животных после ожоговой травмы 125
3.2.3. Оценка влияния липополисахарида на хемилюминесцентную и антиоксдантную активность крови экспериментальных животных с ожоговой травмой 127
3.2.4. Оценка влияния эндотоксемии на показатели про- и антиоксидантных систем крови у крыс 129
3.2.5. Изменение активности миелопероксидазы в ткани легких и тонкой кишки при экспериментальных ожогах 132
3.3. Экспериментально-лабораторное исследование про- и антиоксидантных свойств кожи при ожогах, эндотоксемии и хирургических ранах
3.3.1. Изучение влияния ожога на активность про- и антиоксидантных ферментов в зоне повреждения 134
3.3.2. Изучение реакции кожи вблизи зоны повреждения при ожоговой травме 138
3.3.3. Изучение влияния интраперитонеалыюго введения липополисахарида на активность про-и антиоксидантных ферментов в коже животных 140
3.3.4. Исследование динамики изменения про- и антиоксидантных ферментов кожи и ткани раны при экспериментальных ожогах 141
3.3.5. Изучение влияния полнослойной эксцизионной раны на активность про- и антиоксидантных ферментов в коже животных 147
3.3.6. Анализ изменения активности миелопероксидазы, СОД и каталазы в коже пациентов при операциях по подтяжке тканей лица 151
3.4. Исследование антиоксидантної! активности комплексных препаратов in vitro 153
3.4.1. Эффекты комплекса витаминов-антиоксидантов и аминокислот в модельных системах 153
3.4.2. Эффекты фитопрепарата на основе ферментированной папайи в модельных системах 155
3.5. Изучение эффектов комплексных антиоксидантных препаратов в эксперименте 157
3.5.1. Изучение действия комплекса витаминов-антиоксидантов и аминокислот на параметры про- и антиокидантных систем крови животных при экспериментальных ожогах 158
3.5.2. Влияние комплекса витаминов-антиоксидантов и аминокислот на свойства кожи
при экспериментальных ожогах 163
3.5.4 Эффекты местного применения фитопрепарата на основе ферментированной папайи при ожогах у крыс 168
3.6. Исследование влияния комплекса витаминов-антиоксидантов и аминокислотна показатели про- и антиоксидантных систем крови у детей с ожогами 170
ГЛАВА 4. Заключение 174
Выводы 185
Список литературы 187
