Введение
Глава 1. Протеолитические ферменты бактериальной природы, методы получения и очистки
Глава 2. Способы стабилизации ферментов и сфера их применения 26
Глава 3. Объекты и методы исследований 39
3.1. Объекты исследований 39
3.2. Методы исследований 39
Глава 4. Разработка способа микробного биосинтеза протеолитического фермента
4.1. Изучение влияния компонентов питательной среды на рост и продукцию протеазы 44
4.2. Исследование протеазосинтетической активности Bacillus subtilis ЗН 47
4.3. Масштабирование процесса культивирования и биосинтеза про- 52
теолитического фермента штаммом-продуцентом Bacillus subtilis ЗН
Глава 5. Разработка способа очистки протеолитического фермента Bacillus subtilis ЗН
5.1. Очистка протеолитического фермента, полученного в питательной среде с пептоном 60
5.2. Очистка протеолитического фермента, полученного в питательной среде с дрожжевым экстрактом и мочевиной 72
Глава 6. Получение стабильных форм протеолитического фермента 76
6.1. Иммобилизация протеолитического фермента на полиглюкине 76
6.2. Образование внутримолекулярных сшивок глютаровым альдегидом 79
6.3. Изучение стабильности нативного, иммобилизованного на полиглюкине и сшитого глютаровым альдегидом протеолитического фермента 80
Глава 7. Изучение свойств различных форм протеолитического фермента
7.1. Влияние величины рН на протеолитическую активность 83
7.2. Определение субстратной специфичности 84
7.3. Изучение кинетики протеолиза 85
7.4. Изучение температурного оптимума 90
7.5. Молекулярная масса 91
7.6. Ингибиторный анализ 91
7.7. Изучение раноочищающего и ранозаживляющего действия протеолитического фермента 93
Заключение 98
Выводы 103
Список литературы 104
