Введение
ГЛАВА 1. Литературный обзор 10
1.1. Основы капиллярной электрохроматографии 10
1.2. PLOT-колонки в капиллярной электрохроматографии 20
1.3. Сверхразветвленные полимеры: физико-химические свойства и области применения 32
1.3.1. Терминология, синтез и свойства сверхразветвленных полимеров 34
1.3.2. Синтез и структурные характеристики сверхразветвленных полимеров (СРП) 36
1.3.3. Дендритные полимеры как стационарные фазы в капиллярной электрохроматографии (КЭХ) 37
1.3.4. Использование покрытых капилляров при анализе смесей нейтральных аналитов 40
1.4. Метод эллипсометрии для контроля сорбции белков 44
1.5. Методы on-line концентрирования в капиллярной электрохроматографии 50
1.5.1. Стэкинг 51
1.5.2. Стэкинг нейтральных соединений в мицеллярной электрокинетической хроматографии (МЭКХ) 58
1.5.3. Применение методов стэкинга для анализа 58
ГЛАВА 2. Общая характеристика объектов и методов исследования 60
2. 1. Оборудование 60
2.2. Реактивы 61
2.3. Пробоподготвка биологических жидкостей к анализу 62
2.3.1. Фильтрация пробы 62
2.3.2. Пробоподготовка мочи к анализу альбумина 62
2.4. Методы исследования 64
2.4.1. Капиллярная электрохроматография с использованием монолитных и PLOT-колонок 64
2.4.2. Синтез динамически модифицированной дендритной капиллярной колонки 67
2.4.3. Мицеллярная электрокинетическая хроматография 67
2.4.4. Капиллярный электрофорез смеси стандартов белков 68
2.4.5. Эллипсометрический анализ 68
2.5. Приготовление рабочих растворов 70
2.5.1.Приготовление буферных растворов 70
2.5.4. Приготовление стандартных растворов белков 71
2.6. Обработка полученных данных 71
2.6.1. Определение эффективности в капиллярном зонном электрофорезе (КЗЭ) и капиллярной электрохроматографии (КЭХ) 71
2.6.2. Оценка пористости монолитного сорбента 72
2.6.3. Оценка воспроизводимости процедуры синтеза монолитных капиллярных колонок 73
ГЛАВА 3. Разделение белков на монолитных и plot- метакрилатных колонках методом капиллярной электрохроматографии 74
3.1. Синтез полиметакрилатного полимера in situ 76
3.1.1.Капиллярные полиметакрилатные монолитные колонки 77
3.1.2. Капиллярные PLOT-метакрилатные колонки 79
3.2. Электрохроматографическое разделение белков. 81
ГЛАВА 4. Определение белков методом электрокинетической хроматографии (экх) 85
ГЛАВА 5. Разделение белков на plot-дендритных колонках методом капиллярной электрохроматографии 103
CLASSГЛАВА 6. Эллипсометрия 109
STRONGCLASS
ГЛАВА 7. on-line концентрирование белков в условиях капиллярной электрохроматографии на plot-pei-mal колонках 118
7.1. Стэкинг с большим объемом образца (LVSS – largevolumesamplestacking) 119
7.2. Стэкинг с большим объемом образца с водной пробкой 122
7.3. Стэкинг с большим объемом образца с электростэкингом 124
7.4. Анализ реальных объектов 126
Заключение 130
Список сокращений и терминов 132
Список литературы 136
