Введение
ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 9
1.1. Общая характеристика поджелудочной железы высших животных и человека 9
1.2. Строение, свойства и механизм действия ферментов поджелудочной железы 11
1.2.1. Механизм действия, структура и свойства панкреатической а-амилазы (а-1,4-глюкан-
4-глюканогидролаза, К.Ф. 3.2.1.1) 11
1.2.2. Механизм действия, структура и свойства панкреатической липазы (триацилглицерол-ацилгидролаза, К.Ф. 3.1.1.3) 12
1.2.3. Механизм действия, структура и свойства протеаз 14
1.2.3.1. Трипсин (К.Ф. 3.4.21.4) 15
1.2.3.2. Химотрипсин (К.Ф. 3.4.21.1) 18
1.2.3.3. Карбоксипептидаза Б (пептидил-Ь-лизин (L-аргинин) гидролаза, К.Ф. 3.4.17.2) 21
1.2.4. Механизм действия, структура и свойства рибонуклеазы (К.Ф. 3.1.27.5) 24
1.3. Извлечение ферментов из поджелудочной железы 28
1.3.1. Получение препаратов а-амилазы из поджелудочной железы 29
1.3.2. Получение препаратов липазы из поджелудочной железы 29
1.3.3. Получение протеолитических ферментов из поджелудочной железы 31
1.3.3.1. Получение трипсина 32
1.3.3.2. Получение химотрипсина 33
1.3.3.3. Получение карбоксипептидазы Б 35
1.3.3.4. Получение панкреатина 37
1.3.4. Получение рибонуклеазы 39
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 42
2.1. Объект исследования 42
2.2. Реагенты 42
2.3. Методы анализа 44
2.3.1. Количественное определение азотосодержащих веществ в белковых растворах 44
2.3.2. Определение активности ферментов 45
2.4. Методы исследования 47
2.4.1. Методика экстракции ферментов из биомассы поджелудочной железы 47
2.4.2. Методика проведения процесса ультрафильтрации на ячейках с промышленными ультрафильтрами 48
2.4.2.1.Устройство и принцип действия лабораторной установки концентрирования.48 2.4.2.2. Методика проведения процесса ультрафильтрации на половолоконном модуле промышленного типа 49
2.4.2.3.Методика проведения процесса концентрирования 50
2.4.3. Методика проведения процесса молекулярно-ситовой хроматографии 50
2.4.4. Методика проведения осаждения субстанций ферментов из водных и водно-спиртовых растворов 51
2.4.5. Методика проведения гель-электрофореза в полиакриловом геле 52
2.4.6. Методика проведения культивирования микроорганизмов 52
ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 55
3.1. Исследование процесса экстракции гидролитических ферментов из ПЖ КРС. 55
3.2. Исследование концентрирования ферментсодержащих экстрактов ультрафильтрацией на плоских мембранных элементах и осаждения субстанций ферментов из ретантов 79
3.3. Концентрирование ферментных растворов ультрафильтрацией на мембранных фильтрах половолоконного типа 93
3.4. Осаждение ферментов из водных растворов в изоэлектрической точке 98
3.5. Осаждение ферментов из водно-спиртовых растворов 104
3.6. Получение растворов ферментов, свободных от минеральных примесей и пигментов 111
3.7. Биоконверсия отходов, образующихся при комплексной переработке поджелудочной железы крупного рогатого скота в продукт кормового назначения. 114
ВЫВОДЫ 121
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 122
ПРИЛОЖЕНИЯ 141
Приложение 1 141
Материальный баланс комплексной переработки поджелудочной железы крупного рогатого скота для определения количества образующихся стоков и экономических расчётов 141
Приложение 2 156
