Введение
Глава 1 Обзор литературы 15
1.1 Рецепторы тромбоцитов – потенциальная мишень агрегации тромбоцитов 15
1.1.1 Интегриновые рецепторы тромбоцитов 15
1.1.2 Интегриновые GP IIb/IIIa-рецепторы тромбоцитов 16
1.1.3 Ингибиторы GP IIb/IIIa-рецепторов тромбоцитов 18
1.2 Доноры оксида азота 21
1.2.1 Оксид азота – универсальный биологический медиатор 21
1.2.2 Доноры оксида азота – ингибиторы агрегации тромбоцитов 23
1.2.3 Фуроксаны – экзогенные доноры оксида азота 25
1.3 Математическое моделирование 28
1.3.1 Докинг 28
1.3.2 Оценочные функции 30
1.3.3 Обработка результатов 31
1.4 Инъекционные лекарственные формы 32
1.4.1 Лиофилизат для приготовления раствора для инъекции 32
1.4.2 Лиофилизат наночастиц для приготовления эмульсии для инъекции 33
1.5 Лиофилизация 36
Обсуждение результатов исследований 38
Глава 2 Материалы и методы исследований 38
2.1 Использованные реактивы и материалы 38
2.2 Компьютерное моделирование антагонистов интегрин-рецепторов тромбоцитов 39
2.3 Метод прогнозирования активностей фуроксанов 39
2.4 Методика синтеза пептидов 39
2.5 Методика очистки полученных соединений 41
2.6 Методика подтверждение строения полученных соединений 41
2.7 Методика определения антиагрегационной активности соединений in vitro 41
2.8 Методики определения степени включения гетеромерного пептида в наночастицы 43
2.9 Методики приготовления буферных растворов...
2.10 Оценка качества лиофилизатов 43
2.11 Статистическая обработка результатов 44
Глава 3 Разработка соединений – ингибиторов агрегации тромбоцитов 45
3.1 Пептидные ингибиторы агрегации тромбоцитов 45
3.1.1 Молекулярное моделирование пентапептидов 45
3.1.2 Синтез пептидов с вероятной антиагрегационной активностью 47
3.1.3 Определение антиагрегационной активности синтезированных пептидов in vitro
3.2 Исследование возможности использования имидазо[4,5-e] бензо[1,2-c;3,4-c ]дифуроксанов как ингибиторов агрегации тромбоцитов 49
3.3 Исследование возможности использования гетеромерных пептидов на основе имидазо[4,5-e]бензо[1,2-c;3,4-c ] дифуроксана в качестве антиагрегационных соединений 3.3.1 Компьютерное моделирование гетеромерных пептидов 54
3.3.2 Синтез гетеромерных пептидов с вероятной антиагрегационной активностью 56
3.3.3 Определение специфической активности гетеромерных пептидов in vitro 58
3.3.4 Исследование растворимости и химической стабильности гетеромерных пептидов 60
3.3.5 Подтверждение строения полученных соединений методами хромато-масс-спектрометрии, ЯМР 1Н-спектроскопии (с привлечением двумерных методик 1Н/1Н-спектров COSY), элементного анализа 61
3.4 Заключение 73
Глава 4 Разработка технологии получения лиофилизата гетеромерного пептида для приготовления раствора для инъекции 75
4.1 Получение лиофилизата гетеромерного пептида 75
4.2 Подбор режима замораживания раствора гетеромерного пептида 77
4.3 Разработка режима лиофильной сушки гетеромерного пептида з
4.4 Технология получения лиофилизированного порошка 86
4.5 Заключение 89
Глава 5 Разработка технологии получения лиофилизата наночастиц гетеромерного пептида для приготовления суспензии для инъекции 91
5.1 Получение лиофилизата наночастиц гетеромерного пептида 91
5.2 Выбор носителя и стабилизатора для образования первичной эмульсии гетеромерного пептида в наночастицах 92
5.3 Органический растворитель 92
5.4 Получение первичной эмульсии типа «вода/масло» 93
5.5 Выбор стабилизатора для вторичной эмульсии 95
5.6 Получение вторичной эмульсии типа «вода/масо» 96
5.7 Дополнительное диспергирование вторичной эмульсии гетеромерного пептида 97
5.8 Подбор режима лиофилизации раствора наночастиц гетеромерного пептида 98
5.9 Технология получения лиофилизата гетеромерного пептида в наночастицах 103
5.10 Заключение 109
Глава 6 оценка качества лиофилизатов гетеромерного пептида 111
Заключение 121
Общие выводы 123
Список литературы 125
