Введение
Глава 1. Метод децеллюляризации как перспективная технология регенеративной медицины (обзор литературы) 13
1.1. Технология децеллюляризации 13
1.2. Межклеточный матрикс печени 17
1.3. Децеллюляризации печени. Структура и состав полученного матрикса 19
1.4. Витализация печеночного матрикса и трансплантация рецеллюляризованной печени. 23
1.5. Области применения технологии децеллюляризации 25
1.5.1. Децеллюляризация хряща 25
1.5.2. Децеллюляризация сухожилий 29
1.5.3. Децеллюляризация мышечной ткани 30
1.5.4. Децеллюляризация кости 30
1.5.5. Децеллюляризация сердца 31
1.5.6. Децеллюляризация почки 33
1.5.7. Децеллюляризация легких 33
1.5.8. Децеллюляризация мочевого пузыря 34
1.5.9. Децеллюляризация кишечника 35
1.6. Изделия на основе децеллюляризованного межклеточного матрикса 35
Глава 2. Материалы и методы 40
2.1. Материалы 40
2.2. Клеточные линии 41
2.3. Лабораторные животные 42
2.4. Методы 42
2.4.1. Децеллюляризация печени крысы 42
2.4.2. Анализ сосудистого русла матрикса печени крысы 43
2.4.3. Гистологическое исследование 43
2.4.4. Изучение механических свойств децеллюляризованной ткани печени крысы 44
2.4.5. Изучение механических свойств полученных скаффолдов 45
2.4.6. Получение макрочастиц из децеллюляризованной ткани печени крысы 46
2.4.7. Получение микрочастиц из децеллюляризованной ткани печени крысы 46
2.4.8. Изготовление скаффолдов в виде пленок 47
2.4.9. Анализ содержания ДНК в исследуемых образцах децеллюляризованной ткани 48
2.4.10. Анализ фракции остаточной ДНК в исследуемых образцах децеллюляризованной ткани 49
2.4.11. Анализ структуры образцов методом сканирующей электронной микроскопии 49
2.4.12. Анализ структуры образцов методом сканирующей зондовой нанотомографии 50
2.4.13. Анализ цитотоксичности образцов 51
2.4.14. Анализ пролиферативной активности клеток на децеллюляризованном матриксе ткани печени 52
2.4.15. Анализ пролиферативной активности клеток на скаффолдах и лиофилизированных фрагментах децеллюляризованной ткани 53
2.4.16. Изготовление образцов децеллюляризованного матрикса печени 54
2.4.17. Анализ биохимического состава децеллюляризованной 55
2.4.18. Биодеградация децеллюляризованного матрикса печени 56
2.4.19. Проведения эксперимента по заживлению полнослойной 57
2.4.20. Статистическая обработка результатов экспериментов кожной раны крысы in vivo 58
Глава 3. Результаты 58
3.1. Децеллюляризация печени крысы 58
3.2. Анализ сосудистой системы децеллюляризованной печени крысы 59
3.3. Гистологический анализ структуры полученной децеллюляризованной печени крысы 60
3.4. Исследование механических свойств децеллюляризованной печени крысы 60
3.5. Получение макрочастиц межклеточного матрикса печени крысы печени крысы. 64
3.6. Оценка пролиферативной активности клеток Hep-G2 на макрочастицах межклеточного матрикса децеллюляризованной ткани печени крысы 64
3.7. Анализ содержания ДНК в исследуемых образцах децеллюляризованной ткани печени крысы 66
3.8. Получение лиофилизированных фрагментов децеллюляризованной ткани печени крысы 67
3.9. Анализ биохимического состава децеллюляризованной ткани печени 67
3.10. Биодеградация децеллюляризованной ткани печени 70
3.11. Структура конструкций на основе децеллюляризованной ткани печени крысы 71
3.12. Анализ цитотоксичности, адгезии и пролиферации лиофилизированных фрагментов децеллюляризованной ткани печени крысы 75
3.13. Проведение эксперимента по заживлению кожного покрова крысы in vivo 78
3.14. Получение микрочастиц межклеточного матрикса печени крысы 81
3.15. Изготовление скаффолдов в виде пленок на основе фиброина шелка с включенными в состав микрочастицами децеллюляризованой ткани печени 82
3.16. Структура скаффолдов в виде пленок на основе фиброина шелка с включенными в состав микрочастицами децеллюляризованой ткани печени 83
3.17. Исследование механических свойств скаффолдов 87
3.18. Анализ цитотоксичности, адгезии и пролиферации скаффолдов на основе фиброина шелка 90
3.19. Проведение эксперимента по заживлению кожного покрова крысы in vivo 95
Глава 4. Обсуждение 101
4.1. Децеллюляризация печени крысы 101
4.2. Композитные скаффолды в виде пленок на основе фиброина шелка 114
Заключение 119
Выводы 121
Список основных сокращений 123
Список литературы 124
