Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Общая характеристика изучаемых лекарственных препаратов и особенности их биоаналитической методологии 14
1.1.1. Общая характеристика метилдопы и методики её количественного определения в биологических жидкостях 15
1.1.2. Общая характеристика мебеверина и особенности фармакокинетиче-ских исследований его препаратов 17
1.1.3. Общая характеристика препаратов микофеноловой кислоты и особенности определения микофеноловой кислоты и её метаболитов в биологических жидкостях 20
1.2. Способы стабилизации биологических проб при проведении биоаналитических исследований 28
1.3. Характеристика изучаемых классов потенциально нестабильных соединений 31
1.3.1. Химические свойства фенольных соединений и причины их возможной нестабильности 31
1.3.2. Факторы, влияющие на стабильность глюкуронидов лекарственных веществ в биологических жидкостях 32
Выводы по главе 34
Глава 2. Материалы и методы 35
2.1. Дизайн исследования 35
2.2. Используемое оборудование, стандартные образцы и реактивы 37
2.3 Приготовление калибровочных образцов и образцов контроля качества для проведения биоаналитических исследований 39
2.4. Порядок валидации разработанных методик 42
2.5. Дизайн фармакокинетических исследований 45
2.5.1. Дизайн исследования биоэквивалентности микофенолата натрия в форме таблеток, покрытых оболочкой 47
2.5.2. Дизайн исследования биоэквивалентности метилдопы в форме таблеток 49
2.5.3. Дизайн исследования фармакокинетики мебеверина в форме капсул с пролонгированным высвобождением 51
Глава 3. Разработка методик количественного определения микофеноловой кислоты, метилдопы и метаболитов мебеверина в плазме крови 53
3.1. Разработка методик количественного определения микофеноловой кислоты в плазме крови 53
3.1.1. Разработка методики количественного определения микофеноловой кислоты в плазме крови методом ВЭЖХ-МС/МС 54
3.1.1.1. Предварительное изучение стабильности микофеноловой кислоты в плазме крови 58
3.1.1.2. Изучение обратной конверсии фенольного глюкуронида микофеноловой кислоты в процессе хранения образцов плазмы 59
3.1.1.3. Валидация ВЭЖХ-МС/МС-методики определения микофеноловой кислоты в плазме 60
3.1.2. Разработка методики количественного определения микофеноловой кислоты в плазме крови методом ВЭЖХ-МС 63
3.1.2.1. Исследование обратной конверсии глюкуронидов микофеноловой кислоты в процессе хранения при значении НПКО методики 0,05 мкг/мл 66
3.1.2.2. Валидация ВЭЖХ-МС-методики определения микофеноловой кислоты в плазме 68
3.1.3. Разработка методики количественного определения микофеноловой кислоты в плазме крови методом ГХ-МС 70
3.1.3.1. Изучение зависимости степени извлечения микофеноловой кислоты из водных растворов от рН среды, природы органического растворителя и времени экстракции 74
3.1.3.2. Подбор условий экстракции микофеноловой кислоты из плазмы 75
3.1.3.3. Валидация ГХ-МС-методики определения микофеноловой кислоты в плазме 77
3.1.4. Перекрёстная валидация разработанных методик определения микофеноловой кислоты в плазме крови 79
Разработка методики количественного определения метилдопы в плазме крови 81
3.2.1. Предварительное изучение краткосрочной стабильности метилдопы в плазме и подбор стабилизатора для предотвращения её окисления 85
3.2.2. Валидация методики определения метилдопы в плазме методом ВЭЖХ-МС/МС 88
Разработка методики количественного определения мебевериновой и де метилированной мебевериновой кислот в плазме крови 91
3.3.1. Предварительное изучение стабильности деметилированной мебевериновой кислоты в плазме и обратной конверсии её фенольного глюкуронида 95
3.3.2. Валидация ВЭЖХ-МС/МС-методики определения мебевериновой и демитилированной мебевериновой кислот в плазме 97
Подходы к разработке методик количественного определению веществ, содержащих в структуре фенольные гидроксилы и образующих в процессе метаболизма глюкурониды, в плазме Выводы по главе 107
Глава 4. Результаты фармакокинетических исследований 109
4.1. Результаты исследования биоэквивалентности микофенолата натрия в форме таблеток, покрытых оболочкой, с применением ВЭЖХ-МС/МС 109
4.2. Результаты исследования биоэквивалентности метилдопы в форме таблеток с применением ВЭЖХ-МС/МС 117
4.3. Результаты исследования фармакокинетики мебеверина в форме капсул с пролонгированным высвобождением с применением ВЭЖХ-МС/МС 123
Выводы по главе 128
Обсуждение 130
Общие выводы 137
Практические рекомендации 139
Список сокращений 140
Список литературы 142
Приложение 1 162
Приложение 2 164
Приложение 3 167
Приложение 4 168
Приложение 5 172
Приложение 6 176
Приложение 7 179
