Введение
1. Обзор литературы 9
1.1. Система посттрансляционной модификации SUMO 9
1.1.1. Метаболический путь системы SUMO. Белок-модификатор SUMO и его изоформы 11
1.1.2. SUMO-специфические протеиназы (SENP) 15
1.1.3. Биологические функции системы SUMO 17
1.1.4. Участие системы SUMO в регуляции транскрипции 18
1.1.5. Действие системы SUMO в обеспечении стабильности генома 19
1.1.6. Белки, взаимодействующие с SUMO нековалентным образом 20
1.1.7. Регулирование SUMO модификации 22
1.2. SUMO-протеиназы 23
1.2.1. Семейство SUMO-протеиназ 24
1.2.2. Структура SUMO-протеиназ 27
1.2.3. Субстратная специфичность SUMO-протеиназ 31
1.2.4. Регуляция SUMO протеиназ 37
1.3. Клеточная роль SUMO-протеиназ 40
1.4. Использование SUMO-протеиназы в биотехнологии 44
2. Собственные исследования 54
2.1. Материалы и методы исследований 54
2.1.1. Используемые штаммы 54
2.1.2. Реактивы, растворы 55
2.1.3. Создание штаммов-продуцентов 57
2.1.4. Создание системы клеточных банков 57
2.1.5. Культивирование штаммов-продуцентов 58
2.2. Результаты исследований 62
2.2.1. Создание штаммов-продуцентов SUMO-протеиназ 63
2.2.2. Создание системы клеточных банков промышленного штамма – продуцента, и их характеризация 81
2.2.3. Разработка схемы промышленного культивирования штамма -продуцента ULP – протеиназы 85
2.2.4. Разработка схемы выделения и очистки фермента 109
2.2.5. Исследование стабильности фермента ULP – протеиназы при хранении 118
2.2.6. Технологическая схема производства фермента «Дрожжевая ULP1-протеиназа» 122
2.2.7. Спецификация критериев качества на продукт «Дрожжевая ULP1 – протеиназа» 125
2.2.8. Экономическая эффективность процесса производства фермента ULP1-протеиназа 127
3. Обсуждение полученных результатов 129
4. Выводы 134
5. Практическое использование полученных результатов 134
6. Рекомендации по использованию научных выводов 135
7. Список использованной литературы 136
