Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1.1 Морфологическая организация дофаминергических систем мозга 12
1.2. Нигростриатная дофаминергическая система 13
1.2.1 Морфологическая характеристика нигростриатной дофаминергической системы 13
1.2.2. Функциональная характеристика дофаминергических нейронов нигростриатной системы 15
1.2.2.1 Синтез дофамина 15
1.2.2.2 Запасание, выделение и обратный захват дофамина 20
1.2.2.3 Деградация дофамина
1.2.3 Регуляция дофаминергических нейронов нигростриатной системы 24
1.2.4 Роль дофаминергических нейронов нигростриатной системы в регуляции моторного поведения 25
1.3. Функциональная недостаточность нигростриатной системы при болезни
Паркинсона 27
1.3.1 Патогенез болезни Паркинсона 28
1.3.2. Механизмы нейродегенерации при болезни Паркинсона 30
1.3.2.1 Окислительный стресс 30
1.3.2.2 Глутатион и антиоксидантная система 30
1.3.2.3 Нарушение работы митохондрий 32
1.3.2.4 Эндогенные токсины 34
1.3.2.5 Fe2+ и нейромеланин 35
1.3.2.6 Агрегация белков и убиквинтиновая система 36
1.3.2.7 Воспалительный процесс 38
1.3.2.8 Апоптоз, некроз и аутофагия 39
1.3.3 Компенсаторные механизмы при болезни Паркинсона 40 1.3.4. Экспериментальное моделирование болезни Паркинсона 41
1.3.4.1 Генетические модели 42
1.3.4.2 Нейровоспалительные модели 44
1.3.4.3 Нейротоксические модели 45
ГЛАВА 2. Материалы и методы 54
2.1. Животные и эксперименты 54
2.1.1 Оценка активности тирозингидроксилазы 54
2.1.2 Ингибирование обратного захвата дофамина с помощью 2-метил-4-фенил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-амина 54
2.1.3 Инъекции регуляторного пептида Семакс (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) 2.2 Взятие материала 55
2.3 Высокоэффективная жидкостная хроматография с электрохимической детекцией 58
2.4 Иммуногистохимия 58
2.5 Световая микроскопия и анализ изображений 59
2.6 Полуколичественный анализ содержания тирозингидроксилазы в нейронах черной субстанции и в терминалях аксонов стриатума 60
2.7 Иммуноферментный анализ 61
2.8 Статистическая обработка результатов 62
ГЛАВА 3. Результаты 63
3.1. Морфологическая характеристика и количественный анализ нигростриатной
дофаминергической системы в контроле и в первые сутки после введения МФТП 63
3.1.1 Морфологическая характеристика и количественный анализ тел дофаминергических нейронов в компактной части черной субстанции 63
3.1.2 Морфологическая характеристика и количественный анализ дофаминергических терминалей в дорсальном стриатуме 67
3.2. Функциональное состояние нигростриатной системы в контроле и в первые сутки после введения МФТП 70
3.2.1 Содержание дофамина и 3,4-диоксифенилуксусной кислоты в компактной части черной субстанции 70
3.2.2 Концентрация дофамина и 3,4-диоксифенилуксусной кислоты в дорсальном стриатуме 72
3.2.3 Соотношение содержания 3,4-диоксифенилуксусной кислоты и содержанию дофамину в компактной части черной субстанции 73
3.2.4 Соотношение концентрации 3,4-диоксифенилуксусной кислоты и концентрации дофамину в дорсальном стриатуме 74
3.2.5 Ферментативная активность тирозингидроксилазы в нигростриатной системе после введения МФТП 75
3.2.6 Концентрация глиального нейротрофического фактора в черной субстанции и стриатуме 77
3.3. Функциональная характерисуноктика отдельных дофаминергических нейронов
нигростриатной системы в контроле и в первые сутки после введения МФТП 78
3.3.1 Внутриклеточное содержание тирозингидроксилазы в телах нейронов в компактной части черной субстанции 78
3.3.2 Содержание тирозингидроксилазы в терминалях дофаминергических аксонах нигростриатной системы в дорсальном стриатуме 78
3.3.3 Активность тирозингидроксилазы в отдельном нейроне в компактной части черной субстанции и отдельной терминали в дорсальном стриатуме 79
3.3.4 Содержание дофамина в отдельном нейроне в компактной части черной субстанции после введения МФТП 80
3.3.5 Концентрация дофамина в отдельной терминали аксона в дорсальном стриатуме после введения МФТП
3.4 Влияние ингибитора обратного захвата дофамина – номифензина на нигростриатную систему 82
3.5 Влияние фрагмента адренокортикотропного гормона – Семакс на нигростриатную систему 84
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов 87
4.1. Динамика дегенерации и функциональное состояние выживших дофаминергических нейронов нигростриатной системы после введения МФТП 88
4.1.1 Методические предпосылки изучения динамики дегенерации дофаминергических нейронов нигростриатной системы 88
4.1.2 Динамика дегенерации нигростриатных дофаминергических нейронов под действием МФТП 90
4.2. Модель ранней клинической стадии болезни Паркинсона в период дегенерации дофаминергических нейронов нигростриатной системы в качестве тест-системы для поиска потенциальных нейропротекторов 99
4.2.1 Доказательство возможности использования модели ранней клинической стадии болезни Паркинсона в перилж дегенерации дофаминергических нейронов нигростриатной системы в качестве тест-системы для поиска потенциальных нейропротекторов 99
4.2.2 Использование модели ранней клинической стадии болезни Паркинсона в период дегенерации дофаминергических нейронов нигростриатной системы в качестве тест-системы для тестирования потенциальных нейропротекторов 101
Заключение 105
Выводы 106
Список сокращений 107
Список литературы 108
