Введение
I. Обзор литературы 11
1. Морфология, функции и особенности регенерации кожи 11
1.1. Морфология кожи 11
1.2. Основные функции кожи 15
1.3. Особенности физиологической регенерации кожи 16
2. Кожные раны и их классификация 18
2.1. Классификация ран 18
2.2. Химический ожог 19
3. Особенности заживления ран и современные препараты 20
3.1. Механизмы заживления ран 20
3.2. Фазы заживления ран и их особенности 21
3.3. Митоз и миграция клеток в процессе заживления ран 25
3.4. Сигнальные пути во время заживления ран 26
3.5. Окислительный стресс и регенерация раны 27
3.6. Современные препараты для лечения кожных ран 29
4. Окислительный стресс и антиоксидантные системы кожи 35
4.1. Ферменты-антиоксиданты и их роль в заживлении кожных ран 36
4.2. Пероксиредоксины 41
4.2.1. Роль пероксиредоксинов в защите клеток от окислительного стресса 41
4.2.2. Пероксиредоксины и их роль в заживлении кожных ран 43
4.3. Пероксиредоксин 6 45
5. Факторы, регулирующие процессы регенерации в эпителиальных тканях 49
5.1. Паракринные факторы мезенхимальных стволовых клеток 50
II. Материалы и методы 54
1. Материалы 54
1.1. Животные и этика 54
1.2. Рекомбинантный человеческий пероксиредоксин 6 54
1.3 Паракринные факторы МСК 55
2. Методы 57
2.1. Модель ожога трихлоруксусной кислотой 57
2.1. Модель механической полнослойной кожной раны 58
2.3. Планиметрические методы исследования 59
2.4. Приготовление парафиновых срезов 60
2.5. Гистологический анализ 60
2.6. Иммуногистохимический анализ 61
2.7. Иммуноферментный анализ 61
2.8. Измерение концентрации оксида азота в сыворотке крови 62
2.9. Определение малонового диальдегида 63
2.10. Биохимический анализ крови 63
2.11. Статистический анализ 63
III Результаты исследований 64
1. Химический ожог кожи, вызванный трихлоруксусной кислотой 64
1.1. Динамика регенерации химического ожога кожи 64
1.1.1. Морфология раневого процесса при химическом ожоге 64
1.1.2. Уровень клеточного апоптоза в ожоговой ране 66
1.1.3. Уровень клеточной пролиферации в ожоговой ране 67
1.1.4. Степень окислительного стресса в ожоговой ране 68
1.1.5. Интерлейкиновый профиль ожоговой раны 69
1.1.6. Уровень оксида азота в ожоговой ране 72
1.1.7. Биохимические показатели крови при химическом ожоге 73
1.2. Влияние экзогенного пероксиредоксина 6 (Prx6) и паракринных факторов МСК (кМСК) на динамику заживления химического ожога кожи 75
1.2.1. Влияние Prx6 и кМСК на морфологию ожоговой раны 75
1.2.2. Влияние Prx6 и кМСК на уровень апоптоза в ожоговой ране 78
1.2.3. Влияние Prx6 и кМСК на уровень пролиферации в ожоговой ране 79
1.2.4. Роль Prx6 в нейтрализации окислительного стресса в ожоговой ране 81
1.2.5. Влияние Prx6 и к МСК на интерлейкиновый профиль ожоговой раны 82
1.2.6. Влияние Prx6 и кМСК на биохимические показатели крови при химическом ожоге кожи 84
1.2.7. Роль пероксидазной активности экзогенного Prx6 ожоговой ране 85
2. Влияние экзогенного Prx6 и паракринных факторов МСК (кМСК) на динамику заживления механической полнослойной кожной раны 87
2.1. Влияние Prx6 и кМСК на морфологию механической раны 87
2.2. Влияние Prx6 и кМСК на уровень апоптоза в механической ране 95
2.3. Влияние Prx6 и кМСК на уровень пролиферации в механической ране 96
2.4. Влияние Prx6 и кМСК на биохимические показатели крови после нанесения механической раны 97
IV. Обсуждение результатов исследования 99
Заключение 107
Выводы 109
Список публикаций по теме диссертации 109
Список цитируемой литературы 114
