ВВЕДЕНИЕ...................................................................................................................... 8
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ........................................................................................... 14
1.1. Иммунометаболизм жировой ткани ............................................................... 14
1.2. Регуляция метаболизма глюкозы в адипоцитах............................................ 16
1.3. Регуляция метаболизма липидов в адипоцитах ............................................ 21
1.4. Роль хронического воспаления ЖТ в развитии метаболических нарушений
при ожирении ............................................................................................................. 29
1.5. Механизмы индукции воспаления и ИР в ЖТ при ожирении ..................... 32
1.6. Роль провоспалительных цитокинов в регуляции энергетического
метаболизма................................................................................................................ 38
1.7. Клиническое использование противовоспалительной терапии СД2Т ....... 41
1.8. Роль противовоспалительного цитокина интерлейкина-4 в регуляции
энергетического метаболизма................................................................................... 43
Заключение ................................................................................................................. 46
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ................................................................................... 49
2.1. Культивирование клеток 3T3-L1 .................................................................... 50
2.2. Адипоцитарная дифференцировка клеток 3T3-L1........................................ 50
2.3. Оценка накопления липидов и морфологии липидных капель ................... 51
2.4. Оценка активности термогенеза в адипоцитах.............................................. 51
2.5. Измерение поглощения глюкозы адипоцитами 3T3-L1............................... 51
2.6. Анализ метаболизма 14С-меченой глюкозы в адипоцитах........................... 52
2.7. Омыление и экстракция липидов.................................................................... 52
2.8. Тонкослойная хроматография......................................................................... 53
2.9. Оценка активности гликолиза и митохондриального дыхания................... 54
2.10. Анализ экспрессии белков и активности сигнальных каскадов методом
иммуноблоттинга ....................................................................................................... 54
2.11. Получение лентивирусных векторов........................................................... 55
2.12. Лентивирусная трансдукция адипоцитов 3T3-L1...................................... 57
3
2.13. Оценка транслокации транспортера глюкозы GLUT4 методом
иммуноцитохимии ..................................................................................................... 58
2.14. Статистический анализ................................................................................. 58
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ........................................................................................................... 60
3.1. Влияние ИЛ-4 на поглощение и окисление глюкозы в адипоцитах.............. 60
3.2. Оценка роли транскрипционного фактора STAT6 в регуляции поглощения
глюкозы под действием ИЛ-4................................................................................... 65
3.3 Оценка регуляции инсулин-зависимых процессов под действием ИЛ-4 ...... 67
3.4. Оценка влияния ИЛ-4 на накопление липидов в адипоцитах........................ 71
3.5. Определение регуляции липогенеза и липолиза под действием ИЛ-4 методом
радиоизотопного анализа .......................................................................................... 73
3.6. Анализ роли липолитических ферментов в фрагментации ЛК под действием
ИЛ-4............................................................................................................................. 78
3.7. Регуляция термогенеза в адипоцитах под действием ИЛ-4 ........................... 84
3.8. Исследование роли ATGL в активации окисления глюкозы под действием
ИЛ-4............................................................................................................................. 86
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ............................................................................ 90
4.1. Активация окисления глюкозы.......................................................................... 90
4.2. Сигнальные механизмы регуляции поглощения глюкозы под действием ИЛ4.................................................................................................................................... 93
4.3. Влияние ИЛ-4 на метаболизм липидов............................................................. 96
4.4. Активация термогенеза под действием ИЛ-4 ................................................ 100
4.5. Взаимосвязь метаболических путей, активируемых ИЛ-4........................... 102
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ........................................................................................................... 106
ВЫВОДЫ..................................................................................................................... 107
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.............. 108
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ........................................................................................... 110
