ВВЕДЕНИЕ .................................................................................................................. 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ............................................................................ 13
1.1. Гастроинтестинальные стромальные опухоли: эпидемиология, этиология и
дифференциальная диагностика............................................................................. 13
1.2. Молекулярно-генетические особенности ГИСО ......................................... 18
1.3. Рецепторные тирозинкиназы и сигнальные пути ........................................ 23
1.4. Механизмы резистентности ГИСО к ИМ ..................................................... 35
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ................................... 40
2.1. Объект и предмет исследования ................................................................... 40
2.2. Культивирование, пассирование и хранение клеточных культур ............... 40
2.2. Химические соединения и антитела, использованные в работе ................. 42
2.3. Оценка пролиферативной способности клеток с помощью системы RTCA
iCELLigence ............................................................................................................ 44
2.4. Анализ цитотоксической активности при помощи МТТ-теста ................... 45
2.5. Определение жизнеспособности клеток методом окраски кристаллический
фиолетовый ............................................................................................................. 46
2.6. Анализ экспрессии белков методом иммуноблоттинга (вестерн-блоттинг)
47
2.7. Мультиплексный анализ цитокинов (MAGPIX) .......................................... 52
2.8. Количественная полимеразная цепная реакция на экспрессию гена FGF-2
52
2.9. Оценка апоптоза TUNEL-методом ............................................................... 53
2.10. Оценка инвазивных и миграционных свойств опухолевых клеток ............ 56
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ .......................... 58
3.1. Фенотипические характеристики клеток ГИСО, резистентных к
таргетному препарату ИМ ...................................................................................... 58
3.2. ИМ вызывает изменения секретома ИМ-резистентных клеток ГИСО ....... 63
3.3. FGF-2 ингибирует цитотоксическую активность ИМ в отношении ИМ-
чувствительных клеток ГИСО ............................................................................... 70
3
3.4. FGF-2 лиганд усиливает процессы пролиферации, миграции и инвазии
клеток с признаками резистентности к ИМ ........................................................... 74
3.5. ИМ стимулирует процессы инвазии и миграции клеток ГИСО ................. 77
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ............................................................ 81
ЗАКЛЮЧЕНИЕ .......................................................................................................... 89
ВЫВОДЫ ................................................................................................................... 91
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ..................................................................... 92
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ ..................................... 94
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ........................................................................................ 96
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ .......................................................................................... 98
СПИСОК ИЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА ................................................... 113
