Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Виноград амурский V. amurensis Rupr. как модельный объект для научных исследований 11
1.2. Резуховидка Таля Arabidopsis thaliana (L.) Heynh. как модельный объект12
1.3. Стресс-маркерные гены A. thaliana 13
1.4. Кальциевая сигнальная система и ее роль во внутриклеточной сигнальной системе растений 16
1.5. Сa2+-зависимые протеинкиназы (CDPK): структура и функции 17
1.6. Влияние абиотических стрессов на растение и механизмы устойчивости растений к ним 20
1.7. Трансгенные растения, устойчивые к различным абиотическим стрессам 23
1.8. Экспрессия генов CDPK в V. amurensis под влиянием абиотических стрессов 26
Глава 2. Материалы и методы 29
2.1. Растительный материал 29
2.2. Получение трансгенных каллусных клеточных линий V. amurensis c помощью агробактериальной трансформации 29
2.3. Получение трансгенных растений c помощью метода цветочного погружения 32
2.4. Проверка трансгенности трансформированных растений A. thaliana 33
2.5. Воздействие абиотических стрессов на трансгенные клеточные линии V. amurensis 34
2.6. Воздействие абиотических стрессов на растения A. thaliana 35
2.7. Количественная оценка экспрессии генов 36
2.8. Статистический анализ полученных результатов 39
Глава 3. Результаты 40
3.1. Получение клеточных линии V. amurensis, свехэкпрессирующих гены VaCDPK 40
3.2. Оценка экспрессии экзогенных и эндогенных CDPK в клеточных линиях V. amurensis 41
3.3. Устойчивость VaCDPK-трансгенных клеточных линий V. amurensis к абиотическим стрессам 46
3.4. Получение трансгенных растений A. thaliana, сверхэкспрессирующих гены VaCDPK 55
3.5. Устойчивость VaCDPK-трансгенных растений A. thaliana к абиотическим стрессам 57
3.6. Влияние сверхэкспрессии генов CDPK V. amurensis на экспрессию стресс-индуцируемых и антиоксидантных генов в растениях A. thaliana 62
3.6. Анализ гомологии аминокислотных последовательностей VaCDPK20, VaCDPK21, VaCDPK26, VaCDPK29 72
Глава 4. Обсуждение 75
Заключение 82
Выводы 83
Список литературы 85
