ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ ......................................................... 5
ВВЕДЕНИЕ............................................................................................................................................. 7
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ................................................................................................7
СТЕПЕНЬ РАЗРАБОТАННОСТИ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ...........................................................................9
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ...........................................................................................................9
ЗАДАЧИ, РЕШАЕМЫЕ В ХОДЕ ИССЛЕДОВАНИЯ: .....................................................................................9
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ...........................................................................10
ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ .................................................................12
МЕТОДОЛОГИЯ И МЕТОДЫ ДИССЕРТАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ....................................................14
ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ .............................................................................................15
СТЕПЕНЬ ДОСТОВЕРНОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ...........................................................................................16
АПРОБАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ .......................................................................................17
ЛИЧНЫЙ ВКЛАД АВТОРА В ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ..................................................................17
СООТВЕТСТВИЕ ДИССЕРТАЦИИ ПАСПОРТУ НАУЧНОЙ СПЕЦИАЛЬНОСТИ ............................................18
ПУБЛИКАЦИИ.......................................................................................................................................18
СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ ...................................................................................................18
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР................................................................................................ 20
1.1 ИСТОРИЯ ОТКРЫТИЯ ФУЛЛЕРЕНОВ................................................................................................20
1.2 МЕТОДЫ СИНТЕЗА ФУЛЛЕРЕНОВ ...................................................................................................21
1.2.1 Плазменный метод ...............................................................................................................22
1.2.2 Индуктивное испарение графита........................................................................................22
1.2.3 Испарение графита под воздействием пучка электронов ................................................23
1.2.4 Метод коронного разряда....................................................................................................23
1.2.5 Крекинг углеводородов .......................................................................................................23
1.2.6 Получение водных дисперсий фуллеренов .......................................................................24
1.3 ХИМИЧЕСКИЕ МОДИФИКАЦИИ ФУЛЛЕРЕНОВ ................................................................................25
1.4 ФИЗИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ФУЛЛЕРЕНОВ .........................................................................................27
1.5 ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ФУЛЛЕРЕНОВ.........................................................................................28
1.6 БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ФУЛЛЕРЕНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ...............................................30
1.6.1 Анализ токсичности фуллеренов........................................................................................31
1.6.2 Проницаемость клеточных мембран для фуллерена и его производных .......................38
1.6.3 Антивирусная и антибактериальная активность...............................................................413
1.6.4 Антиоксидантные свойства.................................................................................................48
1.6.5 Противоопухолевая активность..........................................................................................53
1.6.6 Иммунологические свойства...............................................................................................56
1.6.7 Фуллерены и их производные как нейропротекторы.......................................................61
1.6.8 Фуллерены и их производные как радиопротекторы.......................................................66
1.6.9 Доставка лекарственных препаратов с помощью фуллеренов и их производных........70
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ДАННЫМ ЛИТЕРАТУРЫ ............................................................................................70
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ............................................................................................. 71
2.1 ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЙ ...............................................................................................................71
2.2 КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ ФИБРОБЛАСТОВ ...............................................................73
2.3 ИНКУБАЦИЯ КЛЕТОК С ФУЛЛЕРЕНАМИ..........................................................................................73
2.4 МТТ-ТЕСТ......................................................................................................................................73
2.5 ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ МИКРОСКОПИЯ ...............................................................................................74
2.6 ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА.........................................................74
2.7 ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЯ ПРОДУКЦИИ БЕЛКОВ.................................................................................75
2.8 ВЫДЕЛЕНИЕ РНК И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЕЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ................................................................76
2.9 ОБРАТНАЯ ТРАНСКРИПЦИЯ............................................................................................................76
2.10 ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ МЕТОДОМ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ............................77
2.11 ЩЕЛОЧНОЙ МЕТОД “ДНК-КОМЕТ” .............................................................................................79
2.12 СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ .............................................................................80
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ................................................................................... 81
3.1 ВЛИЯНИЕ ФУЛЛЕРЕНОВ БЕЗ ЗАМЕСТИТЕЛЕЙ НА ЭКСПРЕССИЮ СИГНАЛЬНЫХ ПУТЕЙ,
РЕГУЛИРУЮЩИХ ЦИТОПРОТЕКТОРНЫЕ И ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КЛЕТОК............................81
3.1.1 Оценка токсичности фуллеренов без заместителей на жизнеспособность клеток........81
3.1.2 Локализация фуллеренов без заместителей в клетках ФЛЭЧ .........................................83
3.1.3 Влияние фуллеренов без заместителей на уровень АФК и транскрипционную
активность генов, отвечающих за развитие окислительного стресса в клетках ФЛЭЧ.........85
3.1.4 Влияние фуллеренов без заместителей на транскрипционную активность генов,
отвечающих за антиокислительный ответ в клетках ФЛЭЧ.....................................................88
3.1.5 Генотоксичное воздействие фуллеренов без заместителей на клетки ФЛЭЧ ...............92
3.1.6 Воздействие фуллеренов без заместителей на транскрипционную активность системы
репарации клеток ФЛЭЧ ..............................................................................................................94
3.1.7 Воздействие фуллеренов без заместителей на транскрипционную активность
проапоптотичского гена ВАХ и антиапоптотического BCL2 клетках ФЛЭЧ........................964
3.2 ВЛИЯНИЕ ПРИРОДЫ ЗАМЕСТИТЕЛЕЙ ПРОИЗВОДНЫХ ФУЛЛЕРЕНОВ НА ЭКСПРЕССИЮ
СИГНАЛЬНЫХ ПУТЕЙ, РЕГУЛИРУЮЩИХ ЦИТОПРОТЕКТОРНЫЕ И ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
КЛЕТОК.................................................................................................................................................99
3.2.1 Влияние природы заместителей производных фуллеренов C60 с разными группами
заместителей на экспрессию сигнальных путей, регулирующих цитопротекторные и
цитотоксические свойства клеток ...............................................................................................99
3.2.2 Влияние природы заместителей производных фуллеренов C70 с разными группами
заместителей на экспрессию сигнальных путей, регулирующих цитопротекторные и
цитотоксические свойства клеток .............................................................................................125
3.3 ВЛИЯНИЕ МИНОРНЫХ ЗАМЕСТИТЕЛЕЙ ПРОИЗВОДНЫХ ФУЛЛЕРЕНОВ НА ЭКСПРЕССИЮ
СИГНАЛЬНЫХ ПУТЕЙ, РЕГУЛИРУЮЩИХ ЦИТОПРОТЕКТОРНЫЕ И ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
КЛЕТОК...............................................................................................................................................141
3.3.1 Влияние производных фуллеренов С60 с минорными изменениями в фенильном и
тиофенильном радикале на экспрессию сигнальных путей, регулирующих
цитопротекторные и цитотоксические свойства клеток .........................................................141
3.3.2 Влияние производных фуллеренов С70 с одной минорной заменой в тиофенильных
радикалах на экспрессию сигнальных путей, регулирующих цитопротекторные и
цитотоксические свойства клеток .............................................................................................183
3.4 АНТИОКСИДАНТНЫЕ И РАДИОПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА ПРОИЗВОДНЫХ ФУЛЛЕРЕНОВ...........197
3.4.1 Оценка токсичности водорастворимых производных фуллеренов потенциальных
радиопротекторов на жизнеспособность клеток......................................................................198
3.4.2 Исследование радиопротекторного потенциала водорастворимых производных
фуллеренов в клетках ФЛЭЧ......................................................................................................199
ЗАКЛЮЧЕНИЕ .................................................................................................................................. 206
ВЫВОДЫ............................................................................................................................................ 210
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ............................................................................................ 212
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ ............................................................... 213
СПИСОК СТАТЕЙ, ОПУБЛИКОВАННЫХ В ЖУРНАЛАХ, РЕКОМЕНДОВАННЫХ ВАК ПРИ МИНОБРНАУКИ
РОССИИ..............................................................................................................................................213
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ В ДРУГИХ ИЗДАНИЯХ ....................................................................................215
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ..................................................................................... 220
БЛАГОДАРНОСТИ ................................................................................................................................234
