Введение
ГЛАВА 1 Обзор литературы
1.1 Биохимические механизмы поражения нервных клеток при ишемии 14
1.1.1 Этап инициации 16
1.1.2 Этап экспрессии 19
1.1.3 Этап терминации 23
1.2 Различия в чувствительности нейронов разных областей мозга к ишемическому воздействию 24
1.2.1 Области мозга, особо чувствительные к ишемии 25
1.2.2 Причины селективной гибели клеток : 27
1.3 Токсическое действие глутамата при ишемии 31
1.3.1 Пути выброса глутамата при ишемии 32
1.3.2 Типы глутоматных рецепторов 33
1.3.3 Эксайтотоксичность при ишемии и нейродегеперативных заболеваниях 35
1.4 Образование свободных радикалов при ишемии 36
1.4.1 Типы свободных радикалов 37
1.4.2 Пути образования свободных радикалов при ишемии 39
ГЛАВА 2 Материалы и методы исследования
2.1 Модели токсического действия глутамата при ишемии 50
2.1.1 Модель воздействия глутамата на нервные окончания мозга 50
2.1.2 Модель глобальной ишемии переднего мозга in vivo 52
2.1.3 Микродиализ при глобальной ишемии переднего мозга in vivo 53
2.2 Показатели метаболических процессов в ткани мозга 54
2.2.1 Определение внутриклеточной концентрации ионов кальция 54
2.2.2 Определение активности Na+,1С -АТФазы 55
2.2.3 Определение содержания малонового диалъдегида 57
2.2.4 Определение входа 4 Са + в синаптосомы 57
2.2.5 Определение содержания диеновых конъюгатов 58
2.2. б Определение концентрации нейромедиаторных аминокислот 58
2.2.7 Определение содержания белка 60
2.2.8 Определение содержания фосфора неорганического 60
2.3 Анализ данных и статистическая обработка результатов 61
2.3.1 Анализ данных, полученных in vitro 61
2.3.2 Анализ данных, полученных in vivo 62
ГЛАВА 3 Результаты
3.1 Роль различных путей образования свободных радикалов в токсическом действии глутамата in vitro 64
3.1.1 Действие глутамата и ингибиторов реакций образования свободных радикалов на показатели метаболизма в сшаптосомах коры больших полушарий 64
3.1.2 Действие глутамата и ингибиторов реакций образования свободных радикалов на показатели метаболизма в синаптосомах стриатума 77
3.1.3 Действие глутамата и ингибиторов реакций образования свободных радикалов на показатели метаболизма в синаптосомах гиппокампа 82
3.2 Роль фосфолипазного пути образования свободных радикалов в токсическом действии глутамата in vivo 88
3.2.1 Действие ишемии и реперфузии на внеклеточную концентрацию нейромедиаторных аминокислот, активность Na+,К-АТФазы и накопление диеновых конъюгатов 89
3.2.2 Действие ингибиторов фосфолипазы А2 и циклооксигеназы на активность Ыа+Х-АТФазы и накопление диеновых конъюгатов при глобальной церебральной ишемии 94
ГЛАВА 4 Обсуждение
4.1 Роль различных путей образования свободных радикалов в токсическом действии глутамата in vitro 100
4.1.1 Участие свободных радикалов в токсическом действии глутамата 100
4.1.2 Роль NO-синтазного пути образования свободных радикалов... 103
4.1.3 Роль фосфолипазного пути образования свободных радикалов 106
4.1.4 Роль ксантиноксидазного пути образования свободных радикалов 108
4.1.5 Роль митохондриального пути образования свободных радикалов 109
4.2 Роль фосфолипазного пути образования свободных рдикалов в токсическом действии глутамата in vivo 111
4.2.1 Общая характеристика модели глобальной церебральной ишемии и реперфузии 1 11
4.2.2 Роль фосфолипазного пути образования свободных радикалов в окислительном ингибировании Na+,lC-АТФазы и накоплении диеновых конъюгатов при ишемии и реперфузии 114
Заключение 118
Выводы 124
Список литературы 126
