Введение
2. Обзор литературы 8
2.1. Грибы рода Penicillhim как продуценты биологически активных соединений.
2.1.1. Креативность, грибов рода Penicillium. 8
2.1.2. Экологические аспекты поиска новых биологически активных веществ. 10
2.2. Разнообразие вторичных метаболитов алкалоидной природы у грибов рода Penicillium. 11
2.2.1. Эргоалкалоиды. 12
2.2.1.1. Биосинтез эрго алкалоидов. 15
2.2.1.2. Биологическая активность эргоалкалоидов. 17
2.2.2. Дикетопиперазиновые алкалоиды. Рокефортин. 18
2.2.3. Бензодиазепиновые и хинолиновые алкалоиды. 20
2.3. Физиолого-биохимические аспекты биосинтеза алкалоидов. 21
2.3.1. Регуляция биосинтеза алкалоидов. 21
2.3.1.1. Регуляция предшественником. 21
2.3.1.2. Регуляция конечным продуктом. 23
2.3.2. Взаимосвязь алкалоидообразования с ростом и дифференцировкой. 23
2.3.3. Транспорт алкалоидов. 25
2.3.4. Влияние условий культивирования на биосинтез алкалоидов. 26
2.3.4.1. Источник углерода. 26
2.3.4.2. Источник азота. 27
2.3.4.3. Макро- и микроэлементы. 28
2.3.4.4. Аэрация и температура. 30
2.4. Таксон-специфичность биосинтеза вторичных метаболитов у грибов рода Penicillium. 31
3. Экспериментальная часть. 36
3.1. Объекты исследования и условия выращивания. 36
3.2. Оценка роста гриба и конидиобразования. 37
3.3. Выделение и очистка алкалоидных фракций. 37
3.4. Качественный анализ алкалоидных фракций. 38
3.5. Выделение и очистка индивидуальных метаболитов и их идентификация. 38
3.6. Вьтделение и очистка новых метаболитов P. citrinum BKMFW-800 и установление их структуры. 39
3.7. Количественное определение алкалоидов. 40
3.8. Выявление причины снижения концентрации эргоалкалоидов и хиноци-трининов в культуральной жидкости. 40
3.9. Определение спектра биологической активности хиноцитрининов А и Б. 40
3.10. Определение содержания L-триптофана, L-лейцина, L-изолейцина. 41
4. Результаты и их обсуждение. 42
4.1. Скрининг продуцентов вторичных метаболитов среди грибов-реликтов рода Penicillium. 42
4.1.1. Идентификация вторичных метаболитов, продуцируемых штаммами P. aurantiogriseum Diercks 1901. 45
4.1.2. Идентификация вторичных метаболитов, продуцируемых штаммами P. variabile Sopp 1912. 49
4.1.3. Идентификация вторичных метаболитов, продуцируемых штаммом P. citrinum Thorn ВКМ FW-800. 51
4.1.4. Установление структуры и биологическая активность новых метаболитов, продуцируемых штаммом P. citrinum ВКМ FW-800. 54
4.2. Особенности роста P. aurantiogriseum ВКМ FW-766 и биосинтеза роке-фортина 60
4.3. Штаммы P. variabile, как продуценты ругуловазинов. 62
4.3.1. Особенности роста P. variabile ВКМ FW-806 и биосинтеза ругуловазинов. 62
4.3.2. Исследование возможной взаимосвязи процессов роста и развития гриба и биосинтеза ругуловазинов у P. variabile. 66
4.4. P. citrinum ВКМ FW-800, как продуцент эргоалкалоидов и хиноцитрининов. 71
4.4.1. Особенности роста P. citrinum и биосинтеза алкалоидов. 71
4.4.2. Выявление причины снижения концентрации эргоалкалоидов и хиноцитрининов в культуральной жидкости P. citrinum. 16
4.4.3. Влияние аминокислот на рост P. citrinum и биосинтез алкалоидов. 77
4.4.3.1. Влияние L-триптофана, L-лейцина и L-изолейцина, внесенных при посеве. 78
4.4.3.2. Влияние L-триптофана, внесенного в стационарной фазе роста. 82
4.4.3.3. Влияние L-лейцина и L-изолейцина, внесенных в стационарной фазе роста. 85
Заключение 90
Выводы 92
Список литературы 93
