Введение
1 Литературный обзор 12
1.1. История исследований липидов с простой эфирной связью 12
1.2 Номенклатура 14
1.3 Распространение в природе нейтральных липидов с простой эфирной связью 1.3.1 Распространение 1-О-алкил-2,3-диацил-глицеринов в морских беспозвоночных 16
1.3.2 Распределение 1-О-алкил-2,3-диацил-глицеринов в жире печени хрящевых рыб и пищеварительных желез головоногих моллюсков 18
1.3.3 Распределение 1-О-алкил-2,3-диацил-глицеринов в растениях 20
1.3.4 Распределение 1-О-алкил-2,3-диацил-глицеринов у млекопитающих 1.4 Состав алкильных фрагментов в нейтральных липидах с простой эфирной связью 20
1.5 Полярные липиды с простой эфирной связью 22
1.5.1 Распределение плазмалогенов в тканях млекопитающих 22
1.6 Биосинтез липидов с простой эфирной связью и заболевания, вызванные его нарушением 1.6.1 Биосинтез липидов с простой эфирной связью 23
1.6.2 Болезни, связанные с нарушениями в биосинтезе липидов с простой эфирной связью 26
1.7 Токсичность 1-О-алкил-глицеринов 28
1.7.1 Эксперименты на животных 28
1.7.2 Исследования токсичности 1-О-алкил-глицеринов на добровольцах 28
1.8 Биологическая активность 1-О-алкил-глицеринов 29
1.8.1 Влияние 1-О-алкил-глицеринов на проницаемость гематоэнцефалического барьера 29
1.8.2 Иммуностимулирующее действие 1-О-алкил-глицеринов 30
1.8.3 1-О-алкил-глицерины при онкологических заболеваниях 31
1.8.4 Респираторные заболевания 33
1.8.5 Нейродегенеративные заболевания 33
1.8.6 Плазмалоген-замещающая терапия 34
1.8.7 Антибактериальные и противогрибковые свойства 1-О-алкил-глицеринов 36
1.9 Методы выделения 36
1.9.1 Низкотемпературная кристаллизация из органических растворителей 37
1.9.2 Комплексообразование с мочевиной 38
1.9.3 Хроматографические методы 40
1.9.4 Разделение 4 и 5 полиненасыщенных жирных кислот химической модификацией через образование йод-лактонов 41
1.10 Методы анализа 44
1.10.1 Анализ 1-О-алкил-глицеринов 44
1.10.2 Анализ производных плазмалогенов 45
1.10.3 Анализ молекулярных видов липидов с простой эфирной связью 46
2 Экспериментальная часть 48
2.1 Растворители и реактивы 48
2.2 Биологический материал 48
2.3 Экстракция и гидролиз липидов 2.4 Получение метиловых эфиров жирных кислот и диметилацеталей для газожидкостной хроматографии 50
2.5 Получение производных 1-О-алкил-глицеринов для газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием 50
2.6 Выделение 1-О-алкил-глицеринов и полиненасыщенных жирных кислот из жира
командорского кальмара 51
2.6.1 Кристаллизация 1-О-алкил-глицеринов из ацетона 51
2.6.2 Кристаллизация жирных кислот с мочевиной 51
2.6.3 Йод-лактонизация
2.6.3.1 Селективное образование -йод-лактонов докозагексаеновой кислоты 51
2.6.3.2 Селективное образование -йод-лактонов эйкозапентаеновой кислоты 52
2.6.4 Препаративная высокоэффективная жидкостная хроматография этиловых эфиров
полиненасыщенных жирных кислот 53
2.7 Аналитические методы 53
2.7.1 Тонкослойная хроматография 53
2.7.2 Газожидкостная хроматография метиловых (этиловых) эфиров жирных кислот и диметиацеталей 54
2.7.3 Газожидкостная хроматография-масс-спектрометрия 54
2.7.4 Анализ 1-О-алкил-глицеринов тандемной масс-спектрометрией с прямым вводом образца в ионный источник 2.8 Определение противогрибковой активности 1-О-алкил-глицеринов 55
2.9 Определение противоопухолевой активности 1-О-алкил-глицеринов 2.9.1 Определение цитотоксичности 1-О-алкил-глицеринов и пролиферации клеток 56
2.9.2 Неопластическая трансформация клеток (метод мягких агаров) 57 2.10 Определение включения 1-О-алкил-глицеринов и полиненасыщенных жирных кислот в
липиды печени крыс 57
3 Результаты и обсуждение 59
3.1 Состав и содержание 1-О-алкил-глицеринов в морских беспозвоночных 59
3.2 Состав липидов пищеварительной железы кальмара 61
3.3 Масс-спектрометрический анализ 1-О-алкил-глицеринов
3.3.1 Масс-спектрометрия стандартного образца 64
3.3.2 Масс-спектрометрический анализ 1-О-алкил-глицеринов из морских организмов и синтетического октил-глицерина 3.4 Противогрибковые свойства 1-О-алкил-глицеринов 69
3.5 Противоопухолевая активность 1-О-алкил-глицеринов
3.5.1 Цитотоксичность 72
3.5.2 Пролиферация 72
3.5.3 Неопластическая трансформация клеток 73
3.6 Включение 1-О-алкил-глицеринов и n-3 полиненасыщенных жирных кислот в липиды печени крыс 75
3.7 Выделение 1-О-алкил-глицеринов и n-3 полиненасыщенных жирных кислот 77
3.7.1 Щелочной гидролиз липидов пищеварительной железы кальмара 77
3.7.2 Кристаллизация 1-О-алкил-глицеринов из ацетона 78
3.7.3 Выделение эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот из смеси свободных жирных кислот после отделения 1-О-алкил-глицеринов
3.7.3.1 Фракционирование жирных кислот с мочевиной 81
3.7.3.2 Йод-лактонизация 84
3.7.3.3 Высокоэффективная жидкостная хроматография 86
3.7.4 Способ комплексного выделения 1-О-алкил-глицеринов, эйкозапентаеновой и
докозагексаеновой кислот из липидов пищеварительной железы кальмара 88
Заключение 92
Выводы 94
Список литературы 95
