Введение
1. Обзор литературы 8
1.1. Состав жирных кислот губок 8
1.1.1. Насыщенные ЖК 9
1.1.2. МоноеновыеЖК 11
1.1.3. Полиеновые ЖК 15
1.1.4. Жирные кислоты с дополнительными функциональными группами 18
1.2. Состав и молекулярные виды фосфолипидов губок 20
1.3. Локализация сверхдлинноцепочечных жирных кислот в клетках губок 22
1.4. Жирные кислоты ассоциированных с губками микроорганизмов 24
1.5. Жирные кислоты и другое органическое вещество, поступающие к губке с пищей 25
1.6. Хемосистематика представителей типа Spongia на основашш состава жирных кислот 27
2. Материалы и методы 29
2.1. Биологические объекты 29
2.2. Реактивы и материалы 31
2.3. Приборы и оборудование 31
2.4. Экстракция общих липидов , 32
2.5. Приготовление производных жирных кислот 32
2.5.1. Метиловые эфирыЖК (МЭЖК) 32
2.5.2. Пирролидиды ЖК 33
2.5.3. Гидрирование МЭЖК 33
2.5.4. Восстановительный гидразинолиз эйкозапентаеновой кислоты 33
2.5.6. Димстилдисульфидные аддукты моносновых МЭЖК 33
2.6. Разделение МЭЖК по степени ненасыщенности на колонке с силикагелем, импрегнированньш нитратом серебра 34
2.7. Выделение индивидуальных МЭЖК методом ВЭЖХ 34
2.8. Тонкослойная хроматография (ТСХ) 35
2.8.1. Получение золя кремневой кислоты 35
2.8.2. Приготовление ТСХ-пластинок на стеклянной подложке 35
2.8.3. Обнаружение веществ на ТСХ-шгастинках 35
2.8.3.1, Неспецифическое обнаружение веществ 35
2.8.3.2. Специфическое обнаружение веществ 35
2.9. Количественное определение содержания фосфолипидов в экстрактах или хроматографических фракциях 36
2.9.1. Рабочие реагенты для количественного определения фосфора .36
2.9.2. Количественное определение содержания фосфолипидов в экстрактах 36
2.9.3. Количественное определение содержания отдельных классов фосфолипидов..36
2.10. Газо-жидкостная хроматография (ГЖХ) 37
2.11. Газо-жидкостная хроматография - масс-спектрометрия (ГЖХ-МС) 37
2.12. Статистика 38
3. Результаты обсуждение 39
3.1. Определение состава фосфолипидов и жирных кислот 39
3.1.1. Содержание общих липидов и состав фосфолипидов 39
3.1.2. Состав жирных кислот (ЖК) 41
3.1.2.1. Насыщенные ЖК . 41
3.1.2.2. МоноеновыеЖК 43
3.1.2.3. ПолиеновыеЖК 44
3.1.3. Идентификация жирных кислот методом масс-спектрометрии 45
3.1.3.1. Пирролидиды насыщенных ЖК 46
3.1.3.2. Пирролиднды моноеновых ЖК 50
3.1.3.3. Пирролидиды полиеновыхЖК 56
3.2.2-Метил-замещенные моноеновые СДЖК из губки Я. panicea 62
3.3. Изомеры эйкозапентаеновой кислоты нз губки В, baciltifera 66
3.4. Ревизия состава ЖК губок, изучавшихся ранее 72
3.4. Зависимость состава ЖК губки Я. panicea от сезона, места сбора и морфологических особенностей 75
3.5. Сравнительная характеристика симбиотических микроорганизмов губок Я. panicea и О. pennata методом маркерных ЖК 79
3.6. Анализ возможности применения состава ЖК для хемосистематики исследованных видов губок класса Demospongiae 81
3.7. Сравнение состава ЖК бореальных и тропических губок 83
Заключение , 87
4. Выводы 88
5. Список литературы 89
6. Приложение 103
