Введение
CLASS Обзор литератур CLASS ы 7
1.1. Жирные кислоты как таксономические маркеры и их биосинтез в морских организмах
1.2. Изменение состава жирных кислот при акклиматизации к температуре и 10 освещенности
1.3. Состав жирных кислот герматипных кораллов 13
1.4. Передача липидов зооксантеллами кораллу 14
1.5. Роль жирных кислоты в акклиматизации кораллов 15
1.6. Зеленый флуоресцирующий белок 16
1.7. Белки подобные зеленому флуоресцирующему белку 18
1.8. Белки подобные зеленому флуоресцирующему белку в герматипных кораллах 20 2. CLASS Материалы и методы исследования 23 CLASS
2.1. Реактивы и вспомогательные материалы
2.2. Приборы и оборудование 23
2.3. Биологические объекты 23
2.4. Эксперименты 24
2.4.1. Эксперимент по влиянию режима освещения на содержание жирных кислот кораллов
2.4.2. Эксперимент по влиянию режима освещения на интенсивность флуоресценции флуоресцирующих белков
2.5. Аналитические и физико-химические методы 25
2.5.1. Подготовка образцов и разделение клеток зооксантелл и тканей коралла
2.5.2. Методы обработки липидного материала 26
2.5.2.1. Экстракция липидов
2.5.2.2. Приготовление метиловых эфиров жирных кислот 26
2.5.2.3. Газо-жидкостная хроматография и масс спектрометрия метиловых эфиров жирных кислот
2.5.3. Статистический анализ содержания жирных кислот 27
2.5.4. Измерение спектров возбуждения и эмиссии 28
2.5.5. Подготовка образцов и электрофорез 29
2.5.6. Измерение концентрации белка 29
2.5.7. Регистрация спектров эмиссии флуоресцирующих белков кораллов и хлорофилла зооксантелл
2.5.7.1. Исследование продолжительности флуоресценции 30
2.5.7.2. Полипараметрический анализ эмиссионных спектров и индуктивно- 31 резонансного переноса энергии с использованием метода двойной интегральной свертки
3. Результаты и их обсуждение 34
3.1. Состав жирных кислот клеток коралла-хозяина и зооксантелл
3.2. Влияние режима освещения на содержание жирных кислот коралла-хозяина и зооксантелл
3.2.1. Влияние режима освещения на содержание жирных кислот зооксантелл 37
3.2.2. Влияние режима освещения на содержание жирных кислот коралла-хозяина 40
3.3. Влияние режима освещения на интенсивность флуоресценции флуоресцирующих белков
3.4. Выделение флуоресцирующих белков 49
3.4.1. Внешний вид кораллов в видимом и ультрафиолетовом свете
3.4.2. Спектральные характеристики интактных кораллов 51
3.4.3. Электрофорез флуоресцирующих белков 5 2
3.5. Полипараметрический анализ эмиссионных спектров флуоресцирующих белков кораллов и хлорофилла зооксантелл
3.5.1. Полипараметрическое разрешение спектров эмиссии флуоресцирующих белков кораллов и фотосистемы II зооксантелл
3.5.2. Карты спектров возбуждения и эмиссии флуоресцирующих белков кораллов и 60 фотосистемы II зооксантелл
3.5.3. Доказательства индуктивно-резонансного переноса энергии 64
Заключение 70
Выводы 73
Список использованной литературы 74
