Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы транспортные системы центральной нервной системы
Транспорт через гематоэнцефалический и гематоликворный барьеры
Создание гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к BSAT1, получение
Пассивная диффузия
Транспор с помощью носителя (транспортер-опосредованный перенос)
Эндоцитоз
Активный транспорт
Функциональная экспрессия транспортеров на сайтах гематоэнцефалического барьера
Семейство АВС-транспортеров
Р-гликопротеин Белок BCRP / Bcrp
Белки множественной лекарственной устойчивости (MRPs / Mrps) Суперсемейство SLC транспортеров
Транспортеры органических анионов OATs / Oats Транспортеры органических катионов OСTs / Oсts
Транспортеры органических анионных полипептидов OATPs / Oatps BSAT1 (blood-brain barrier-specific anion transporter 1)
ГЛАВА 2. Материалы и методы
Характеристика исследуемого материала
Культура клеток миеломы мышей линии Balb/C Sр2/0-Ag14 Культура клеток глиомы С6 крысы
Животные Культуры клеток
Получение первичной культуры церебральных эндотелиоцитов крысы
Получение первичной культуры астроцитов неонатального мозга крысы
Получение первичной культуры эндотелиоцитов пуповины человека (HUVEC)
Подготовка субстрата для культивирования эндотелиальных клеток
Совместное культивирование эндотелиоцитов с астроцитами
моноклональных антител и их характеристика
Получение препарата рекомбинантного антигена BSAT1 Получение моноклональных антител к BSAT1 и их характеристика
Проведение иммунизации
Процедура слияния 11 11
Подготовка клеток фидерного слоя
Процедура клонирования гибридом
Замораживание и хранение гибридом
Получение асцитов и очистка моноклональных антител
Определение класса иммуноглобулинов моноклональных антител
Методы иммунохимического анализа
Иммуноферментный анализ
Иммуноморфологический анализ
Иммунофлюоресцентный анализ
Иммуноцитохимический анализ
Методы количественного определения белка
Иммуногистохимический анализ Конъюгация антител с флуорофором Конъюгация антител
Приготовление наногелей, конъюгированных с анти-BSAT1-антителами Исследование когнитивных функций у крыс
Тест распознавания нового объекта
Тест спонтанного чередования
Тест пассивного избегания
Приподнятый крестообразный лабиринт
Тестирование в лабиринте Морриса
Моделирование интракраниальной глиомы
Статистическая обработка полученных результатов
Результаты собственных исследований
ГЛАВА 3. Получение моноклональных антител к рекомбинантному экстраклеточному домену специфического транспортера органических анионов церебральных эндотелиоци-тов и изучение их иммунохимических свойств
ГЛАВА 4. Иммуноморфологический анализ органной, тканевой и клеточной локализации BSAT
ГЛАВА 5. Изучение влияния анти-BSAT1-антител на когнитивные функции беременных крыс и их потомства
ГЛАВА 6. Исследование распределения меченных I125 и AlexaFluor 660 анти-BSAT1-антител in vivo и оценка перспектив применения моноклональных антител для селективной доставки контейнерных систем экспериментальную глиому 101
Выводы
Список литературы
