Введение
1. Основные сведения об длкогольдегидрогеназе из печени лошади 6
1.1. Структура алкогольдегидрогеназы из печени лошади 8
1.2. Субстратная специфичность алкогольдегидрогеназы из печени лошади 18
1.3. Коферментная функция НАДГ" (НАДН) 21
1.4. Механизм действия алкогольдегидрогеназы из печени лошади 26
2. Эффекторы алкогольдегидрогеназы из печени лошади 36
2.1. Влияние на каталитическую активность алкогольдегидрогеназ ионов тяжелых металлов и органических реагентов, взаимодействующих с сульфгидрильными (SH-) группами фермента 37
2.2. Влияние неорганических анионов на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы из печени лошади 38
2.3. Влияние на каталитическую активность алкогольдегидрогеназ органических реагентов, образующих комплексные соединения с каталитическим цинком фермента 42
2.4. Влияние жирных кислот и их амидов на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы из печени лошади 46
2.5. Влияние на каталитическую активность алкогольдегидрогеназ ацетилирующих реагентов 49
2.6. Влияние на каталитическую активность алкогольдегидрогеназ аналогов субстрата и кофермента 52
2.7. Влияние на каталитическую активность АДГ лекарственных препаратов 54
3. Способы получения и реактивации различных апоферментов 56
4. Исходные вещества, посуда, аппаратура, методика эксперимента, обработка результатов измерений 64
4.1. Исходные вещества 64
4.2. Посуда, аппаратура 67
4.3. Методика эксперимента 68
4.4. Обработка результатов измерений 69
5. Обоснование выбора фермента и индикаторной реакции; оптимизация условий ее проведения 69
6. Влияние на каталитическую активность адг из печени лошади неорганических ингибиторов 76
6.1. Влияние ионов тяжелых металлов на каталитическую активность АДГ из печени лошади 76
6.2. Тип ингибирования алкогольдегидрогеназы из печени лошади ртутью(И) 90
6.3. Определение ртути(11), серебра(1), цинка(П) и олова(ІУ) по их ингибирующему действию на алкогольдегидрогеназу из печени лошади 94
6.4. Влияние некоторых неорганических анионов на каталитическую активность АДГ из печени лошади 96
7. Влияние на каталитическую активность адг из печени лошади органических производных ртути и олова 99
7.1. Влияние метилртути на каталитическую активность АДГ из печени лошади 100
7.1.1 Определение метидртути по ее ингибиругощему действию на алкогольдегидрогеназу из печени лошади 103
7.1.2. Чип ингибирования алкогольдегидрогеназы метилртутью 105
7.2. Влияние на каталитическую активность АДГ из печени лошади метил-, диметил- и триметилолова 110
7.2.1. Тип ингибирования алкогольдегидрогеназы метилоловом 115
8. Влияние на каталитическую активность адг различных органических веществ 118
8.1. Влияние на каталитическую активность АДГ из печени лошади карбоновых кислот 11.8
8.1.1. Влияние на АДГ из печени лошади предельных неразветвленных одноосновных карбоновых кислот (Сз-С]б) 120
8.1.2. Возможные причины влияния жирных кислот на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы из печени лошади 129
8.1.3. Тип ингибирования алкогольдегидрогеназы из печени лошади масляной кислотой 133
8.1.4. Влияние некоторых двухосновных карбоновых кислот на активность АДГ из печени лошади 135
8.1.5. Влияние некоторых жирных кислот на активность АДГ из пекарских дрожжей 140
8.1.6. Определение янтарной кислоты в лекарственных растениях 145
8.2. Влияние на каталитическую активность АДГ из печени лошади ряда аминокислот 149
8.2.1 Определение пролина, триптофана и гистидина по их ингибирующему действию на алкогольдегидрогеназу из печени лошади 156
8.2.2. Тип ингибирования алкогольдегидрогеназы триптофаном 158
8.3. Влияние азотсодержащих органических соединений на каталитическую активность АДГ из печени лошади 160
8.3.1 Определение азотсодержащих соединений по их ингибирующему действию на алкогольдегидрогеназу из печени лошади 171
8.3.2. Возможные причины влияния азотсодержащих органических соединений на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы 174
9. Получение и реактивация апофермента адг из печени лошади 180
9.1. Выбор лиганда и условий для получения апоалкогольдегидрогеназы из печени лошади 180
9.2. Изучение влияния цинка(П) на псевдоапо-алкогольдегидрогеназу из печени лошади, полученную с использованием 1,10-фенантролина 187
9.3. Влияние ионов металлов на псевдоапо-алкогольдегидрогеназу из печени лошади, полученную в присутствии 1,10-фенантролина 190
9.4. Получение истинного апофермента алкогольдегидрогеназы и его реактивация ионами цинка и кобальта 198
9.4.1 Получение апофермента алкогольдегидрогеназы с использованием 1,10-фенантролина 199
9.4.2. Получение апофермента алкогольдегидрогеназы с использованием 2,6-дипиколиновой кислоты 204
Заключение 208
Выводы 209
