Введение
1 Обзор литературы . 11
1.1 Строение и функции кожи . 11
1.2 Иммуногистохимическое изучение кожи 12
1.2.1 Гистохимическая структура кератиноцитов 13
1.2.2 Гистохимическая структура дермо-эпидермального соединения . 15
1.2.3 Иммуногистохимическое изучение сосудов дермы 17
1.3 Микроциркуляторное русло кожи . 18
1.4 Сахарный диабет . 20
1.4.1 Факторы, участвующие в развитии микроангиопатий . 22
1.4.1.1 Метаболические факторы 23
1.4.1.2 Гемодинамические факторы 24
1.4.2 Изменения сосудистой стенки при сахарном диабете 2 типа 26
1.4.3 Морфологические изменения микроциркуляторного русла кожи нижних конечностей при сахарном диабете 27
1.4.4 Изменения структуры межклеточного матрикса кожи при сахарном диабете . 28
1.5 Участие VEGF в ангиогенезе . 29
1.6 Физиологическая регенерация кожи . 32
1.6.1 Гомеостаз эпидермиса 32
1.6.2 Стволовые клетки эпидермиса 33
1.6.3 Особенности миграции кератиноцитов 34
1.6.4 Микроокружение стволовых клеток кожи . 36
1.6.4.1 Понятие о нише стволовых клеток . 36
1.6.4.2 Влияние базальной мембраны на гомеостаз эпидермиса . 37
1.6.4.3 Влияние интегринов на гомеостаз эпидермиса . 38
1.6.4.4 Влияние внеклеточного матрикса на гомеостаз эпидермиса . 39
1.7 Маркеры морфофункционального состояния кожи 39
1.7.1 Маркеры пролиферации 39
1.7.2 Маркеры апоптоза 41
2 Материал и методы исследования . 43
2.1 Опытные группы . 43
2.2 Классические гистологические методы 45
2.3 Иммуногистохимический метод . 46
2.3.1 Иммуногистохимический метод с использованием полимерной си стемы EnVision (фирмы Dako) и первичных антител к PCNA (FL-261), Bcl-2 (C 21), CD-31 (2F7B2) 49
2.3.2 Иммуногистохимический метод с применением полимерной системы ULTRAVISION Quanto (фирмы Lab Vision Thermo Scientific) с первичными антителами к CD 31, клон 1А10, и к коллагену IV, клон PHM-12 50
2.3.3 Иммуногистохимический метод с использованием системы REVEAL – Biotin – Free Polyvalent DAB с первичными антителами к цитокера-тину 1, клон 34B4, и цитокератину 10, клон LHP1 . 50
2.3.4 Иммуногистохимический метод с использованием системы REVEAL – Biotin – Free Polyvalent DAB с кроличьими поликлональными антителами к VEGFR-1 (flt -1) (C – 17) . 51
2.4 Морфометрический метод исследования . 52
3 Результаты исследования 58
3.1 Уровень экспрессии ядерного антигена пролиферирующих клеток в эпидермисе ампутированной нижней конечности больных СДС 58
3.2 Изучение экспрессии антиапоптотического маркера Bcl-2 в эпидермисе ампутированной нижней конечности больных СДС 60
3.3 Экспрессия маркеров терминальной дифференцировки кератиноцитов 1 и 10 в эпидермисе ампутированной конечности больных СДС 64
3.4 Измерение толщины эпидермиса и базального слоя эпидермиса при синдроме диабетической стопы 69
3.5 Изучение сосудистой системы кожи больных диабетической ангиопа-тией . 71
3.5.1 Изменение толщины базальной мембраны сосудов в условиях диабетической ангиопатии 75
3.5.2 Изменение экспрессии рецепторов VEGFR-1 в коже больных СДС 78
4 Обсуждение . 80
5 Выводы 93
Список сокращений 95
6 список литературы 96
Список иллюстративного материала
